因肿瘤、外伤、放射性骨坏死、骨髓炎、牙周炎或先天疾病等导致的颅颌面骨缺损直接影响口腔颌面部修复，颌骨缺损修复时新骨形成的质量、速度和长期稳定性与种植义齿修复息息相关。多年来，临床医师和研究者们尝试利用自体或异体骨移植、人工骨移植、细胞或／和生长因子介导的组织工程技术、屏障膜及骨牵张等临床技术，在修复颌骨或牙槽骨缺损方面取得了一定的成效。近年来，骨缺损修复的理念更倾向于——结合细胞及活性分子的骨支架材料植入机体后能引导及促进机体自身组织的再生修复，因此，设计模仿骨再生生理机制的骨缺损修复方案至关重要。根据颅颌面膜内成骨的特点，我们选择了在骨缺损修复初期能促进血管再生的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)，和在骨缺损修复中后期能调控其下游信号通路促进新骨再生的信号分子SonicHedgehog(Shh)，目的是通过对这两种关键因子的调控，模拟机体骨缺损修复过程，探寻理想的促颌骨缺损修复方案。方法是利用腺相关病毒高效稳定的感染效率及四环素调控系统对外源基因的开关作用，构建重组病毒rAAV2-Shh及rAAV2-tet-off-bFGF；将两种病毒共同感染原代培养的大鼠骨髓间充质干细胞；继而将这种转基因细胞与β-磷酸三钙复合形成可调控的基因增强型组织工程骨；并通过在四环素衍生物Dox的调控下，体外检测双因子时序表达和三维培养对细胞生物学性状、胞内成骨因子水平的影响；最后将这种可调控的基因增强型组织工程骨移植到大鼠颅骨缺损区，通过Dox调控使骨缺损修复初期bFGF过表达，中后期以Shh表达为主，组织学观察双因子时序调控对缺损区骨组织再生修复的影响，形态学检测新骨形成面积及新生血管密度。结果显示，bFGF协同Shh的分阶段治疗能促进大鼠颅骨缺损区血管再生及新骨形成，新生血管的密度与新骨面积有显著相关性。说明这种双因子时序调控的基因增强型组织工程技术，可以模拟机体自身骨修复不同阶段的生理过程，能更好的促进大鼠颅骨缺损再生修复。