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目的：共表达质粒pSi-E6-P53通过下调癌基因E6同时上调抑癌基因P53发挥对人子宫颈癌生长的抑制作用，探讨癌基因与抑癌基因失衡导致肿瘤发生的可能机制。方法：应用基因重组技术构建共表达质粒pSi-E6-P53。体外实验用脂质体将质粒pSi-E6、pP53及pSi-E6-P53瞬时转染至子宫颈癌SiHa细胞。应用RT-PCR和Western Blot方法检测E6、P53及相关基因和蛋白表达。TUNEL染色检测肿瘤细胞的凋亡。体内实验复制裸鼠子宫颈癌皮下移植瘤模型。应用电转化技术将质粒pSi-E6、pP53及pSi-E6-P53电转化至减毒鼠伤寒菌，将携带上述质粒的减毒鼠伤寒菌经尾静脉注射到裸鼠体内，观察其对裸鼠子宫颈癌皮下移植瘤生长的影响。应用Western Blot检测E6、P53及相关蛋白表达。HE染色观察减毒鼠伤寒菌对裸鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及肿瘤组织形态学的影响。免疫组织化学法检测PCNA蛋白在肿瘤组织中的表达。结果：经酶切和测序鉴定，成功构建了共表达质粒pSi-E6-P53。体外实验中，RT-PCR和Western Blot实验结果显示，pSi-E6-P53能够使E6表达下调的同时使P53表达上调，并且上调Bax、cleaved-Caspase3、Caspase8、cleaved-Caspase9的表达，下调Bcl-2的表达，与Mock组、pSi-Scramble组、pSi-E6组及pP53组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。TUNEL染色结果显示pSi-E6-P53组SiHa细胞出现显著凋亡，与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。体内实验证实，应用减毒鼠伤寒菌携带质粒治疗SiHa细胞裸鼠移植瘤，与pSi-E6组和pP53组比较，pSi-E6-P53组肿瘤体积明显缩小，重量明显减轻，差异有统计学意义（P<0.05）。RT-PCR和Western Blot实验结果显示，pSi-E6-P53能够使肿瘤细胞中E6基因mRNA与蛋白表达下调，同时使肿瘤组织中P53基因mRNA与蛋白表达上调，差异有统计学意义（P<0.05）。随着E6表达下调， P53表达上调，使Bax、cleaved-Caspase3、Caspase8、cleaved-Caspase9表达上调， Bcl-2的表达下调，差异有统计学意义（P<0.05）。HE染色证实pSi-E6-P53组在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏形态学上与对照组无显著差异。免疫组织化学结果显示， pSi-E6-P53组PCNA蛋白表达下调，与Mock组、pSi-Scramble组、pSi-E6组及pP53组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：1.共表达质粒pSi-E6-P53通过下调癌基因E6同时上调抑癌基因P53,发挥对人子宫颈癌的抑制作用，其机制可能与促进肿瘤细胞凋亡有关。一方面通过内源途径，抑制Bcl-2蛋白的表达，进而导致相关蛋白Bax、Cyto-c、cleaved-Caspase9的表达上调，激活Caspase3；另一方面通过外源途径，诱导Caspase8蛋白表达，启动Caspase3活化，最终抑制子宫颈癌的生长。2.为了克服了单独应用SiRNA E6和单独应用P53的缺点，采用共表达质粒pSi-E6-P53通过下调癌基因E6，减少P53的降解，同时上调抑癌基因P53的表达，从调节癌基因E6和抑癌基因P53平衡的角度为子宫颈癌的治疗提供了新线索。