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本论文包括三部分内容:第一部分:常规染色体检测和FISH在慢性巴细胞白血病中的应用及意义;第二部分:GAL3基因在慢性淋巴细胞白血病中表达水平和临床的意义;第三部分:三例伴有t(18;22)(q21;q11)慢性淋巴细胞白血病的分子遗传学研究第一部分常规染色体检测和FISH在慢性淋巴细胞白血病中应用目的 研究DSP30和IL-2在慢性淋巴细胞白血病常规染色体检测中的价值;应用FISH技术研究CLL的临床、分子遗传学特性。方法 DSP30联合IL-2刺激CLL细胞增殖,CLL细胞培养72 h后进行染色体制备,采用R显带法进行核型分析;对85例患者进行荧光原位杂交(fluorescence in situhybridization,FISH)检测,与同期核型结果进行比较。使用FISH技术检测563例CLL患者的染色体情况,分析其与临床、细胞遗传学以及疾病预后的关系。结果89例CLL患者中,无分裂相者5例,94.38%(84/89)的患者染色体分析成功,异常检出率为60.71%(51/84),复杂核型者占52.94%(27/51)。对85例CLL患者进行了 FISH检测,异常检出率为87.06%(74/85),其中复杂核型2例,占2.70%(2/74)。85例进行FISH检测的CLL患者中,5例无分裂相,异常检出率为62.50%(50/80);其中FISH检测异常而核型正常者25例,核型异常而FISH检测无异常者4例,两者结合检测出异常者78例,异常检出率91.76%。FISH方法检测到的13q-异常明显高于常规核型分析(P<0.001),11q-、+12、17p-异常检出率两种方法的差异无统计学意义(P>0.05)。常规核型分析对复杂异常的检出率明显高于FISH(P>0.05)。563例患者均进行FISH检测,385例FISH异常,178例FISH无异常,其异常检出率为 68.38%(385/563)。234 例(41.56%)为单纯 13q-;56 例(9.95%)检出为+12 异常,12 例(2.3%)为 11q-,19 例(3.37%)为 17p-,63 例(11.19%)同时检测出两种及两种以上的异常。其中13q-伴17p-异常者22例,13q-伴有11q-者19例,13q-伴有+12者15例,+12伴11q-者4例,复杂FISH3例。11q-与17p-两组的首次治疗时间(TTFT)无统计学差异(P>0.05),预后最差。+12和≥两种异常两组TTFT无明显差异,预后中等。13q-与FISH正常组的中位TTFT均不能触及,两种TTFT无统计学差异(P>0.05),预后较好。结论DSP30联合IL-2可以提高CLL患者常规染色体异常的检出率,对复杂异常核型的检测更为有效;FISH异常检出率高于常规核型分析方法,对缺失片段较小的13q-异常更为敏感,两者结合不仅将染色体异常检出率提高至91.76%,FISH可为CLL研究提供较为准确的分子遗传学信息。13q-、17p-、+12、11q-是影响CLL预后的重要因素。可对CLL患者进行更为准确的预后分层,从而为临床提供更多信息。第二部分GAL3在慢性淋巴细胞白血病中表达水平和临床意义目的:检测Gal-3在慢性淋巴细胞白血病患者中的表达水平,并分析其临床意义。方法:用荧光定量PCR技术测定30例CLL患者外周血或骨髓血中Gal-3表达水平,10例正常对照。结果:30例CLL患者Gal-3的表达显著高于健康对照(P<0.05);不同分组Gal-3的表达水平:伴有17q-组CLL患者Gal-3表达显著高于不伴有17p-的CLL患者组,余分组中Gal-3的表达水平差异均无显著统计学意义(均P>0.05)。结论Gal-3在CLL患者表达水平明显高于正常人,Gal-3高表达可能是CLL的预后不良因素。第三部分三例伴有t(18;22)(q21;q11)慢性淋巴细胞白血病的细胞及分子遗传学研究目的:报告3例伴有t(18;22)(q21;q11)的慢性淋巴白血病方法:CLL细胞使用Bcr/ab1,Bcl-2探针进行FISH分析;进行人全基因组序;并在DNA水平进行PCR扩增,电泳后,割胶送检测序。结果:例1因无标本未能进行FISH检测;例2FISH检测为BCL-2重排阳性,BCR重排阴性;例3检测为BCL-2重排73%,BCR重排70%;3例均进行全基因组测序。本组3例患者均累及BCL-2基因,但与之发生易位的22q11位点的基因不同。例1、例2为IGLL5,例3为MIR650。根据患者人全基因组重测序结果,在DNA水平进行验证,例2缺乏标本未做验证;例1和例3验证断裂位点正确,位于18号染色体下端,22号染色体上端。结论t(18;22)(q21;q11)是慢性淋巴细胞白血病中一种少见的非随机的染色体易位