在血浆脂蛋白中,变性的低密度脂蛋白(modified low density lipoprotein,mLDL)被公认为是导致动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的危险因子,巨噬细胞通过其表面的A类清道夫受体(scavenger receptor classA,SR-A),可以无限制地摄取mLDL,如氧化的低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)、乙酰化的低密度脂蛋白(acetylated low density lipoprotein,ac-LDL)等,导致胆固醇在细胞中异常蓄积,并使其自身泡沫化,而形成AS病灶,所以细胞泡沫化可作为AS的特征性标志<[1]>.基于以上原理本实验在体外用人单核细胞株U937为细胞材料,利用佛波酯将其诱导为单核巨噬细胞,根据单核巨噬细胞细胞膜上的SR-A可大量摄取ox-LDL的特点,以ox-LDL作为配基,建立人单核巨噬细胞泡沫化模型,旨在寻找具有作用于巨噬细胞泡沫化过程的抗动脉粥样硬化的先导化合物或候选药物.将U937单核细胞经佛波酯(PMA)诱导,使其分化为巨噬细胞后,每孔加入12 μ g氧化的低密度脂蛋白(ox-LDL),37℃培养48小时,建成单核巨噬细胞泡沫化模型,利用油红0染色、显微镜下观察细胞泡沫化的情况.以基因工程技术表达的人清道夫受体A类Ⅱ型(SR-AII)的胞外可溶性部分作为样品,加入到泡沫细胞模型中,理论上认为它可通过与巨噬细胞表面的SR-A竞争结合ox-LDL而有效地阻断或抑制巨噬细胞摄取ox-LDL,从而抑制泡沫细胞的形成.实验结果恰好验证了这一推测,也进一步验证了U937单核巨噬细胞表面确实有大量的SR-A表达,并且此受体在泡沫细胞形成过程中发挥了主要作用.应用建立的模型从2600个微生物次级代谢产物中筛选出有抑制细胞泡沫化活性的阳性发酵液8个,并对它们进行了抗菌活性研究,对重点阳性菌株2495进行了生物学鉴定、发酵条件摸索和发酵液活性成分性质的初步研究.筛选了84个化合物发现5个阳性化合物,其中化合物2101-C为新化合物脱氧新羟曲霉酸,此化合物除了能抑制巨噬细胞泡沫化的作用外,还具有上调高密度脂蛋白受体表达活性的作用.应用此模型还筛选了136个发酵液提取物,找到6个发酵液提取物有抑制细胞泡沫化的作用.本模型还可作为对SR-A和B类清道夫受体(SR-B)拮抗剂等分子水平筛选模型进行综合评价的细胞模型.