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目的:龋病作为口腔中最常见的慢性感染性疾病,具有发病率高、分布广泛的特点。变异链球菌（Streptococcus mutans,S.mutans）作为最主要的龋病致病菌,其致病性不仅包括产酸性和耐酸性,更为重要的是变异链球菌能够通过合成胞外多糖（Extracellular polysaccharide,EPS）促进菌斑生物膜的形成。菌斑生物膜作为龋病的始动因子能够促进微生物相互作用、维持微环境的酸性理化特征。因此,使用抗生素抑制变异链球菌的活性并减少菌斑生物膜的形成是龋病防治的主要策略之一,但过度使用抗生素会导致细菌耐药性增强进而导致这一防治手段在长期治疗中效果不理想。抗菌肽（Antibacterial peptides,AMPs）作为天然抗菌剂主要通过破坏细胞膜发挥抗菌作用,这种特殊的抗菌机制使细菌不易产生耐药性。由于在耐药性方面弥补了抗生素的短板,并且具备良好的抑菌效果,使用AMPs进行龋病防治为临床治疗提供了新思路。特异性靶向抗菌肽（Specifically targeted antimicrobial peptides,STAMPs）不仅不易导致细菌产生耐药性,而且具有良好的靶向性,能够在不影响口腔正常菌群的情况发挥对致病菌的抑制作用。本文旨在设计并合成一种新型的针对变异链球菌的特异性靶向抗菌肽,为临床龋病的防治提供新方案。方法:1.通过查阅文献进行特异性靶向抗菌肽的设计,以CSPC16作为靶向定位区域,以抗菌肽IG-13-1作为抗菌区域,设计出新型特异性靶向抗菌肽C16-IG-13-1,利用PSIPRED蛋白质结构预测服务器对C16-IG-13-1的二级结构进行预测,并使用标准固相合成技术（Fmoc保护法）合成C16-IG-13-1。2.以C16-IG-13-1作为实验组,IG-13-1作为阳性对照组,CSPC16作为阴性对照组,采用微量肉汤稀释法检测上述三组多肽对S.mutans、血链球菌（Streptococcus sanguinis,S.sanguinis）以及黏性放线菌（Actinomyces viscosus,A.viscosus）的最小抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（Minimum bactericidal concentration,MBC）。3.通过平板菌落计数法计算C16-IG-13-1在1 min时对S.mutans、S.sanguinis以及A.viscosus的抗菌率。4.分别在加入C16-IG-13-1后的1 min、5 min、10 min、20 min、30 min、60min通过平板菌落计数法记录S.mutans、S.sanguinis以及A.viscosus的菌落数,并绘制时间-杀菌曲线。5.通过扫描电子显微镜（Scanning electron microscope,SEM）观察空白对照组以及实验组（C16-IG-13-1组）中S.mutans的细胞形态变化。6.通过结晶紫染色法测定C16-IG-13-1对S.mutans生物膜形成的抑制作用,并通过MTT染色法观察在成熟S.mutans生物膜中C16-IG-13-1对S.mutans的抑制作用。结果:1.经PSIPRED蛋白质结构预测服务器预测C16-IG-13-1的二级结构主要为α-螺旋结构,并通过标准固相合成技术（Fmoc保护法）成功合成了C16-IG-13-1、IG-13-1及CSPC16。2.成功测定出C16-IG-13-1、IG-13-1和CSPC16对S.mutans,S.sanguinis和A.viscosus的MIC和MBC。其中C16-IG-13-1对S.mutans,S.sanguinis和A.viscosus的MIC分别为5μM、10μM和20μM,MBC分别为10μM、20μM和40μM。3.在1 min时,C16-IG-13-1对S.mutans的抗菌率为98.28%,对S.sanguinis的抗菌率为38.16%,对A.viscosus的抗菌率为8.62%,差异具有统计学意义（P＜0.001）。4.通过时间-杀菌曲线可观察到浓度为10μM的C16-IG-13-1作用10 min时S.mutans全部死亡,S.sanguinis和A.viscosus在60 min时仍有大量细菌存活。5.SEM能够观察到空白对照组中S.mutans细胞完整,表面光滑,未见到细胞碎片或细胞裂解,而C16-IG-13-1组可观察到S.mutans细胞表面粗糙,细胞膜破裂,可见大量的细胞碎片。6.结晶紫染色结果显示C16-IG-13-1可明显减少S.mutans生物膜的形成,同时MTT实验结果证明C16-IG-13-1对成熟S.mutans生物膜有破坏作用。结论:1.本研究成功通过标准固相合成技术（Fmoc保护法）合成新型抗菌肽C16-IG-13-1。2.通过对C16-IG-13-1的抗菌活性及靶向特异性的测定,表明C16-IG-13-1对S.mutans具有显著的抗菌作用及靶向特异性。3.C16-IG-13-1能够通过破坏S.mutans的细胞膜发挥抗菌作用。4.C16-IG-13-1能够显著抑制S.mutans生物膜的形成,同时能够破坏成熟的S.mutans生物膜。