犬源益生芽孢杆菌的筛选及初步应用

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:tcliany
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犬细菌性腹泻是临床中常见的疾病,主要是由于肠道中菌群比例失调而引发的。临床治疗一般选用抗生素加补液疗法。近期,因抗生素的不合理使用而出现的耐药菌株,使得细菌病的治疗越来越复杂。芽孢杆菌作为安全性和抗逆性都极佳的益生菌已在畜牧行业被广泛应用,但对犬功效的报道还较少。因此,本研究旨在筛选优良的犬源芽孢杆菌,研究其对动物免疫功能的影响,以便为其日后在犬日粮中的合理使用奠定一定基础。本研究采用热处理法从犬粪中分离芽孢杆菌,通过抑菌试验,药物敏感性试验,耐酸、胆盐和高温试验筛选出一株芽孢杆菌,经形态学、生化试验和16S rDNA序列分析鉴定为枯草芽孢杆菌,命名为QY-20。以昆明鼠为试验动物,观察枯草芽孢杆菌对鼠伤寒沙门菌感染动物的保护力。选取48只小鼠,随机分为SP组、BS组、LB组和SL组,分别灌胃生理盐水、108 CFU/mL枯草芽孢杆菌、10%肠胃宝益生菌、108 CFU/mL枯草芽孢杆菌和10%肠胃宝益生菌的等量混合菌剂,剂量均为0.2 mL/只,试验期四周。分别于试验开始第14天和第28天,每组随机选择3只小鼠,进行眼球采血,无菌摘取胸腺、脾脏并收集盲肠内容物,测出免疫器官指数以及盲肠内容物中菌群的变化;用ELISA方法对收集到的血清进行IgG、IL-4、INF-γ的检测,试验第28天时,将各组剩余小鼠以3LD50腹腔注射鼠伤寒沙门菌,观察枯草芽孢杆菌对小鼠的保护力,测出脾脏和肠内容物中的荷菌量,并制作空肠石蜡包埋切片。结果表明:(1)随着试验天数的增加,各试验组昆明鼠体重都有不同程度增长,BS组增长最明显。(2)饲喂枯草芽孢杆菌QY-20能显著增加小鼠盲肠中乳酸菌数目,降低大肠杆菌数目。(3)饲喂枯草芽孢杆菌QY-20后,BS组脾脏指数、胸腺指数、血清中IgG、IL-4、IFN-γ水平较SP组均显著或极显著增加;SL组胸腺指数、血清中IL-4、IFN-γ水平较LB组均增加显著。(4)BS组死亡率比SP组低66.7%,SL组死亡率比LB组低16.7%。(5)饲喂枯草芽孢杆菌QY-20能显著或极显著减少盲肠内容物和脾脏中鼠伤寒沙门菌的数量。(6)攻毒后SP组肠道损伤最严重,BS组损伤最轻微;SL组损伤较LB组轻微。从以上结果可知,枯草芽孢杆菌QY-20可以提高昆明鼠的免疫功能和对鼠伤寒沙门菌感染的抵抗力,其与肠胃宝益生菌共同作用效果优于后者单独使用。
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