目的观察T-2毒素(T-2 toxin)、以及T-2毒素与脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)毒素联合对生长发育期大鼠肝微粒体中CYP1A2含量及活性的影响,探讨T-2毒素单独作用损伤效应及与DON毒素联合损伤效应,观察其组织病理损伤,为真菌毒素中毒的防治提供技术途径。方法30只四周龄的雄性Wistar大鼠幼鼠,按照完全随机化的方法分为3组,每组10只,即空白组、T-2毒素组、“T-2+DON”组,染毒方法为模拟自然进食方式经口摄入掺毒饲料,T-2毒素含量为150μg/kg;联合组为T-2毒素100μg/kg,DON毒素220μg/kg。实验期限分为15日和30日。断头处死,取肝脏差速离心法制备肝微粒体,放置于-80℃冰箱冻存。采用双抗体夹心酶联法(ELISA)检测大鼠肝微粒体中CYP1A2的含量及活性,观察T-2毒素及T-2与DON联合毒素对肝脏的毒性作用。切取小鼠的肝脏、结肠部、肾脏、食管第三生理狭窄部制备石蜡切片,采用HE染色检测各器官病理改变情况。结果1、染毒15天后,空白对照组CYP1A2的含量为5.560±0.287(ng/ml),T-2组为3.825±0.120(ng/ml),独立样本t检验得P<0.01,CYP1A2含量明显降低;染毒30天后,空白对照组CYP1A2含量为7.300±0.687(ng/ml),T-2组为3.224±0.318(ng/ml),联合组为2.254±0.133(ng/ml),经单因素方差分析P<0.01,单独T-2染毒组CYP1A2含量下降,联合染毒组降低更加明显。2、染毒30天后,空白对照组CYP1A2含量为7.300±0.687(ng/ml),T-2组为3.224±0.318(ng/ml),联合组为2.254±0.133(ng/ml),经单因素方差分析P<0.01,单独T-2染毒组CYP1A2含量下降,联合染毒组降低更加明显;空白对照组CYP1A2活性为14.026±1.17(U/ml),T-2组为9.358±0.509(U/ml),联合染毒组为8.89±0.727(U/ml),经单因素方差分析,染毒组的CYP1A2活性明显降低(P<0.01)。但T-2染毒组与联合染毒组(T-2毒素+DON毒素)之间CYP1A2的活性差异无统计学意义(P>0.05)。3、染毒时间的不同所致肝微粒体中CYP1A2的变化:当染毒时间染毒为15天:肝微粒体中CYP1A2的含量为3.825±0.120(ng/ml)30天:肝微粒体中CYP1A2的含量为3.224±0.318(ng/ml)。将两组时间段CYP1A2的含量进行两独立样本t检验:t=3.99,P=0.011(P≤0.05),说明当T-2毒素的染毒周期不同,大鼠肝微粒体中CYP1A2的含量也随之不同。4、组织病理学组织检查显示,与组织形态结构正常的空白对照组各脏器相比,15天T-2染毒组幼鼠肝脏未见明显病理改变;30天T-2染毒组幼鼠可见部分肝细胞水肿,胞浆可见不规则空泡;联合染毒组幼鼠可见肝细胞胀大,胞浆疏松,呈气球样变。15天T-2染毒组幼鼠肠可见肠黏膜下层水肿,间隙增大,黏膜层可见炎性细胞浸润;30天T-2染毒组幼鼠可见部分肠黏膜上皮细胞糜烂性坏死脱落;联合染毒组幼鼠可见肠黏膜上皮细胞糜烂性坏死脱落,肠黏膜固有层组织水肿,细胞间隙增大。15天T-2染毒组幼鼠肾脏可见蛋白管型,部分肾小管管腔内有粉红色蛋白黏液渗出,部分肾小管上皮细胞水肿,胞浆内可见形态不规则,边界模糊的空泡;30天T-2染毒组幼鼠可见部分肾小球系膜增生,肾小球囊腔消失;联合染毒组幼鼠可见蛋白管型,部分肾小管管腔内有有粉红色蛋白粘液渗出,部分肾小球囊腔内可见有粉红色蛋白滴液。15天T-2染毒组幼鼠食管组织形态结构正常,未见明显病理变化;30天T-2染毒组幼鼠食管上皮可见质层增厚,角化过度;联合染毒组幼鼠可见食管上皮角质层增厚,角化过度,鳞状上皮增生明显。结论(1)T-2毒素可致CYP1A2的含量与活性降低,且T-2毒素和DON毒素联合作用更明显,这可能是机体T-2毒素和DON毒素中毒的机制之一。(2)T-2毒素可致肝脏、结肠、肾脏、食管的病理损伤,且T-2毒素和DON毒素联合作用更明显。(3)染毒时间的长短影响大鼠肝微粒体中CYP1A2的含量和活性的改变,随着染毒时间的延长,大鼠肝微粒体中CYP1A2的含量和活性均下降,对大鼠各组织器官的损害程度也越大。