药用真菌桑黄的培养特性及黄酮类成分产生规律的研究

来源 :鲁东大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:rjviva
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桑黄是著名的药用菌物,在中国诸多的本草古籍当中都有明确记载,功效颇多。本研究搜集了5个桑黄菌种,对其菌丝体的固体和液体培养特性进行研究;并采用瓶栽方式,以粮食培养基栽培桑黄,对桑黄不同生长阶段的黄酮类物质产生规律进行了探讨,并分析了5个菌种培养物的黄酮类物质的多样性特征。首先,本研究通过多渠道搜集并进行分子鉴定,获得了5个不同菌种:Sanghuangporus quercicola(栎生桑黄)、Phellinus nigricans(黑盖木层孔菌)、Tropicoporus linteus(裂蹄纤孔菌)、Sanghuangporus bamuii(暴马桑黄)、Inonotus hispidus(粗毛纤孔菌)。本研究从基础培养基、碳源、氮源三个方面,分析了5个菌种的固体培养特性。栎生桑黄、黑盖木层孔菌、裂蹄纤孔菌以及粗毛纤孔菌4个菌种的最适基础培养基均为PDA培养基,暴马桑黄为GPY培养基;适合5个菌种生长的碳源均包括甘露糖,同时果糖、葡萄糖也适合多个菌种的生长;适合5个菌种生长的氮源均包括蛋白胨,并且5个菌种在尿素的培养基上均无法正常生长。本研究从基础培养基、碳源、氮源三个方面,分析了5个菌种的液体培养特性。栎生桑黄、暴马桑黄以及粗毛纤孔菌3个菌种的最优液体培养基均为GPY液体培养基,黑盖木层孔菌的最优液体培养基为PDA液体培养基,裂蹄纤孔菌的最优液体培养基为麦麸液体培养基。液体培养中,栎生桑黄、粗毛纤孔菌适合的碳源为果糖,适合的氮源均为蛋白胨;黑盖木层孔菌适合碳源为木糖醇、山梨醇,适合的氮源为牛肉膏;裂蹄纤孔菌最适合的碳、氮源分别是甘露糖和蛋白胨;暴马桑黄最适合的碳、氮源分别是葡萄糖和牛肉膏。研究了桑黄子实体的瓶栽方法。培养过程中,多个菌种均会在燕麦、薏米培养基表面沁出黑色液滴,散发出刺激性气味,后期还出现了软烂的状况;裂蹄纤孔菌在小米培养基上以及暴马桑黄在大米和小米培养基上也会出现培养基软烂的状况。整个栽培过程中,除粗毛纤孔菌外的4个菌种均能在玉米培养基上良好生长,粗毛纤孔菌在大米、玉米培养基上未有子实体形成,在小米、燕麦、薏米培养基上均生长状况良好。本研究分析了5个菌种不同生长阶段黄酮类物质的产生规律。在栽培后期,栎生桑黄、黑盖木层孔菌、裂蹄纤孔菌以及暴马桑黄在玉米培养基上的总黄酮产量均能高于同一月份的其他粮食培养基;粗毛纤孔菌在小米、燕麦、薏米培养基上总黄酮产量都较低,均未超过1mg/g。5个菌种中,黑盖木层孔菌在玉米培养基上的总黄酮产量最高,最高产量可达6.41mg/g。本研究探讨了5个菌种黄酮类成分的多样性特征。本次研究共检测到10个黄酮类代谢物,栎生桑黄、黑盖木层孔菌、裂蹄纤孔菌以及粗毛纤孔菌中均检测到了6种黄酮类的化合物,暴马桑黄中检测到了8种黄酮类的化合物。5个菌种的培养物中均含有儿茶素、3,7-二氧-甲基槲皮素、桔皮素、川陈皮素、3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮这5个化合物,其中3,7-二氧-甲基槲皮素在5个菌种中的相对含量普遍较高。
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