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目的:通过分析Toll样受体2(Toll-like receptors2,TLR2)、髓样分化因子(Myeloid differentiation primary response 88,MyD88)、核因子-?B(Nuclear factor-?B,NF-κB)的mRNA、蛋白及相关炎性因子的改变,探讨难治性肺炎支原体肺炎(Refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia,RMPP)的发病机制,以期能有助于早期识别和早期干预。方法:病例选择为2017年10月至2018年10月就诊于内蒙古医科大学赤峰临床医学院的患儿,根据纳入及排除标准分别设立健康对照组、RMPP组及普通肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)组。所有入选病例详细记录临床资料,于就诊时或住院后抽取静脉血2ml,4℃条件下以转速3000rmp/min,离心10min,将得到的血清及细胞成分分装在无菌EP管内。分别应用酶联免疫吸附实验法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中人γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、人白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)、人半胱氨酰白三烯(Human cysteinyl leukotrienes,CysLTs)以及人单核细胞趋化蛋白4(Monocyte chemotactic protein-4,MCP-4)的含量,应用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测患儿血中TLR2、MyD88、NF-κB的mRNA和蛋白表达量。将所得到的数据进行统计分析。结果:1.RMPP组的病程天数、发热天数均高于MPP组,差异有统计学意义(P<0.05)。2.RMPP组及MPP组血中的白细胞计数(White blood cell,WBC)、中性粒细胞百分比(Percentage of neutrophils,N%)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RMPP组与MPP组相比WBC、N%、CRP及LDH显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。3.RMPP组和普通MPP组血中IFN-γ、CysLTs、IL-8和MCP-4指标明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RMPP组与普通MPP组相比,IFN-γ、CysLTs和IL-8指标明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),MCP-4无差异(P>0.05)。4.RMPP组血中TLR2、MyD88、NF-κB的mRNA表达水平显著高于MPP组及对照组,差异有统计学意义(P<0.05);MPP组TLR2的mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),MyD88和NF-κB表达无差异(P>0.05)。5.RMPP组和普通MPP组血中TLR2、MyD88、NF-κB的蛋白表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RMPP组与普通MPP组相比,TLR2、MyD88、NF-κB蛋白表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.MPP患儿WBC、N%、CRP、LDH、病程和发热时间显著增高时提示可能为RMPP;2.RMPP组患儿血中IFN-γ、CysLTs和IL-8显著增高,提示免疫功能紊乱是导致RMPP的原因之一;3.RMPP患儿TLR2/MyD88/NF-κB通路异常活化可能与炎性因子表达增高有关。