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目的:研究土槿皮乙酸(Pseudolaric Acid B,PAB)对人胰腺癌PANC-1细胞的增殖、凋亡作用,为进一步的临床研究及应用提供依据。方法:体外培养人胰腺癌PANC-1细胞,观察PAB对人胰腺癌PANC-1细胞的作用:通过CCK-8实验和细胞克隆形成实验,检测PAB对胰腺癌PANC-1细胞的生长抑制作用;通过Hoechst33258染色,观察PAB对PANC-1细胞的凋亡形态学改变;通过PI单染流式细胞术,检测PAB对PANC-1细胞周期的影响;通过Annexin V-PI双染,检测PAB对PANC-1细胞凋亡的影响;通过Western blot技术,检测凋亡相关蛋白caspase-3,caspase-9和JNK蛋白的表达量。结果:不同浓度的PAB对PANC-1细胞的生长抑制呈现出剂量和时间相关性:随着药物浓度的增加,对细胞的抑制作用逐渐增强,浓度为16μmol/l作用24h抑制率为52.58%;相同浓度的PAB对细胞的抑制作用随着时间的延长不断增强,浓度为2μmol/l作用72h抑制率为52.61%。对细胞形成克隆也具有浓度相关性,浓度越高,抑制作用越明显。Hoechst33258染色和PI单染流式检测加Annexin V-PI双染检测显示:PAB能够促进细胞的凋亡,将细胞周期阻滞于G2/M期。浓度为16μmol/l时,G2/M期细胞比例明显升高,凋亡率为37.47%±1.50%,与对照组相比具有统计学差异。Western blot结果显示:PAB能够提高caspase-3、caspase-9和JNK蛋白的表达量,且PAB浓度越高,与凋亡信号相关蛋白的表达量也越高。结论:1.土槿皮乙酸作用于人胰腺癌PANC-1细胞24、48、72h,细胞增殖明显受到抑制,且表现为剂量依赖性和时间依赖性;2.土槿皮乙酸作用于人胰腺癌PANC-1细胞7天后,能有效抑制PANC-1细胞形成的克隆数;3.土槿皮乙酸能够诱导人胰腺癌PANC-1细胞凋亡:土槿皮乙酸作用于PANC-1细胞48h后,Hoechst33258染色可见实验组细胞数量减少,部分细胞出现胞质减少,胞核固缩、边聚、裂解和凋亡小体等凋亡形态学变化;4.土槿皮乙酸作用于人胰腺癌PANC-1细胞48h后,通过PI单染流式细胞仪检测细胞周期发现:实验组G0/G1期细胞比例明显减少,G2/M期细胞比例明显增多,提示土槿皮乙酸可以将PANC-1细胞周期阻滞于G2/M期;5.土槿皮乙酸能够诱导细胞凋亡,作用机制与激活caspase-3,caspase-9和JNK信号通路相关。