SDF-1α/CXCR4对THP-1细胞迁移及其与血管平滑肌细胞黏附的影响

来源 :南华大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:quintentwc93
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趋化因子SDF-1α及其受体CXCR4在胚胎发育、肿瘤细胞转移及介导免疫缺陷病毒(HIV)感染中发挥重要作用,最近又在动脉粥样硬化斑块中发现SDF-1α高表达,SDF-1α/CXCR4与动脉粥样硬化的关系已经引起重视。 本研究首先探讨SDF-1α对单核细胞的趋化作用,然后在Ox-LDL处理的血管平滑肌细胞和单核细胞上对SDF-1α/CXCR4的表达进行研究,最后对SDF-1α/CXCR4在单核细胞/血管平滑肌细胞黏附的作用进行研究。 目的:探讨SDF-1α对单核细胞趋化作用及其Ox-LDL、苦瓜蛋白对SDF-1α趋化单核细胞的影响;Ox-LDL对THP-1细胞CXCR4、rVSMC的SDF-1α表达的影响;SDF-1α/CXCR4对THP-1/rVSMC黏附的影响。 方法:用小室迁移试验来研究SDF-1α对单核细胞的趋化作用,将单核细胞或经Ox-LDL处理的单核细胞加入上室,在上、下室分别加入苦瓜蛋白、SDF-1α孵育10小时后计数各组下室迁移的细胞数。RT-PCR检测CXCR4或SDF-1α mRNA的表达,Western blot检测其蛋白表达变化,观察ox-LDL对THP-1细胞CXCR4、rVSMC的SDF-1α表达的剂量和时间效应。用免疫组化检测SDF-1α在颈总动脉套环兔模型中的表达变化。用静态黏附实验来研究THP-1/rSMC的黏附,原代培养的rVSMC与50μg/ml Ox-LDL孵育48h,将单核细胞与平滑肌细胞共孵育后洗脱检测黏附作用,并加用SDF-1α抗体阻断。 结果:SDF-1α呈浓度依赖性诱导单核细胞的迁移,加入CXCR4抗体可明显抑制这种作用。经不同浓度Ox-LDL处理48h后的THP-1细胞再用10ng/ml SDF-1α进行趋化时,结果发现Ox-LDL呈浓度依赖性的增加单核细胞的迁移,50μg/ml Ox-LDL组所迁移的细胞数是对照组的11倍。苦瓜蛋白则呈浓度依赖性的抑制单核细胞的迁移。THP-1细胞有基础水平的CXCR4表达,50μg/ml Ox-LDL可
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