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目的 观察Bcl-2 siRNA和Bcl-xl siRNA对人类肝癌细胞HepG2药物敏感性的影响和作用机制。 方法 碱裂解法提取psiBcl-2和psiBcl-xl载体，共转染到肝癌细胞HepG2中，用G418筛选稳定的阳性细胞克隆，克隆扩大培养。用RT-PCR检测Bcl-2、Bcl-xlmRNA水平，免疫荧光检测目的基因Bcl-2、Bcl-xl蛋白水平的表达。用不同浓度的5-FU和HCPT处理稳定转染细胞，用MTT观察细胞对药物敏感性的影响。用一种药物浓度处理细胞，用流式细胞术观察细胞凋亡情况。Western blot检测Bcl-2、Bcl-xl、Bax和caspase-3蛋白，观察目的基因Bcl-2和Bcl-xl沉默后对Bax、caspase-3蛋白水平的影响。 结果 RT-PCR检测到目的基因Bcl-2 mRNA在Bcl-2 siRNA转染组和Bcl-2 siRNA／Bcl-xl siRNA共转染组均减低，而在正常细胞组，阴性载体转染组和Bcl-xl siRNA转染组Bcl-2 mRNA的水平无变化；Bcl-xl mRNA在Bcl-xl siRNA转染组和Bcl-2 siRNA／Bcl-xl siRNA共转染组均减低，而在正常细胞组，阴性siRNA载体转染组和Bcl-2 siRNA转染组Bcl-xl mRNA的水平无变化。免疫荧光显示在Bcl-2 siRNA和Bcl-xl siRNA转染组目的基因的荧光强度较正常细胞和阴性载体转染的细胞明显减弱。用不同浓度的5-FU(13、130、1300、13000mg／L)处理细胞24h后MTT结果显示Bcl-2 siRNA／Bcl-xl siRNA共转染组、Bcl-2 siRNA、Bcl-xl siRNA转染组的细胞生长抑制率明显高于阴性载体转染组和正常细胞(28.07±1.98％，23.30±4.08