【摘 要】
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目的:本实验通过建立高脂血症小鼠模型探讨葛根（葛根提取物、葛根素）是否通过调控肠道菌群及短链脂肪酸的变化,修复肠黏膜屏障,降低全身炎症水平,进而干预脂质代谢基因的m RNA表达水平调节高脂血症,初步探讨葛根调节高脂血症的作用机理。方法:通过HFD干预10周成功复制HLP小鼠模型,造模成功后灌胃给予葛根4周。用UHPLC-QTOF-MS非靶标代谢组学法检测葛根中有效活性成分;血清中总胆固醇（TC）、
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目的:本实验通过建立高脂血症小鼠模型探讨葛根（葛根提取物、葛根素）是否通过调控肠道菌群及短链脂肪酸的变化,修复肠黏膜屏障,降低全身炎症水平,进而干预脂质代谢基因的m RNA表达水平调节高脂血症,初步探讨葛根调节高脂血症的作用机理。方法:通过HFD干预10周成功复制HLP小鼠模型,造模成功后灌胃给予葛根4周。用UHPLC-QTOF-MS非靶标代谢组学法检测葛根中有效活性成分;血清中总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量通过试剂盒检测;通过制作HE染色、油红O染色病理切片观察肝组织炎性细胞浸润、脂质沉积以及结肠组织炎性细胞浸润和肠黏膜屏障损伤程度;16S r RNA检测小鼠肠道菌群的丰度及多样性;GC-MS高通量靶标代谢组学法检测小鼠肠道内容物短链脂肪酸的变化;ELISA法检测小鼠结肠组织中分泌型免疫球蛋白A（s Ig A）含量和血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）、脂多糖（LPS）等含量;实时荧光定量PCR（Q-PCR）法检测SREBP-1c、Lx R、IL-18、CYP7A1等m RNA相对表达量;蛋白印迹法（WB）检测结肠组织ZO-1、Occludin和NLRP3等蛋白表达量;四联抗生素清除肠道菌群。结果:葛根干预后与模型组相比小鼠血清中TC、LDL-C水平降低（P<0.05）,HDL-C水平升高（P<0.01）,肝组织的空泡样改变、脂质沉积和炎性细胞浸润程度减轻。葛根干预组相较于模型组小鼠肠道菌群丰度增加、多样性减少,乙酸、丙酸等短链脂肪酸含量增加。与模型组比较,葛根能明显减轻HLP模型小鼠结肠组织炎性细胞浸润以及NLRP3、Caspase-1、IL-18等表达水平,增加ZO-1、Occludin和s Ig A等表达量,修复肠黏膜屏障,减少LPS入血。葛根干预后肝脏胆固醇合成相关基因m RNA相对表达水平下调,分解相关基因m RNA相对表达水平表达上升。抗生素清除小鼠肠道菌群,复制HLP小鼠模型并给予葛根干预。结果表明,清菌模型组与模型组相比血脂水平以及肝脏炎性细胞浸润、空泡样改变和脂滴沉积更严重;与葛根干预组相比,清菌后葛根干预效果减弱。清菌模型组与模型组相比结肠组织炎症表达水平以及肠黏膜损伤更严重,LPS入血增多,血清炎症水平升高;与葛根干预组相比,清菌后葛根降低结肠组织和血清炎症水平以及修复肠黏膜损伤效果减弱。同时,清菌模型组与模型组相比胆固醇合成相关基因的m RNA相对表达水平升高,代谢相关基因的m RNA相对表达水平降低;与葛根干预组相比,清菌后葛根干预效果减弱。结论:1、葛根能够修复HLP模型小鼠肠黏膜屏障,减轻结肠组织炎症水平以及内毒素入血,缓解机体慢性代谢炎症;2、葛根可能通过干预肠菌代谢调节肝脏脂代谢基因的表达水平;3、葛根通过调控肠道菌群丰度和多样性,增加短链脂肪酸含量,修复肠黏膜屏障,减轻结肠组织炎症,减少内毒素入血进而减轻全身炎症反应干预肝脏脂代谢基因m RNA表达水平降低血脂水平调节高脂血症。
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