拟南芥转录因子基因AtMYB59功能的初步研究

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MYB基因家族是拟南芥基因组中最大的转录因子超家族,这个家族参与了很多的生物学过程。本实验室已取得的研究结果表明,MYB家族基因AtMYB59及其在拟南芥中的同源基因AtMYB4及在水稻中的两个同源基因OsMYBAS1和OsMYBAS2,都进行保守的可变剪接,预示这两个基因可能在植物的生长发育过程中起着重要作用。 本实验室完成了拟南芥和水稻的全部MYB转录因子的系统进化分析,并预测了100个可能具有生物学功能的基序。进一步分析表明,AtMYB59及其同源蛋白质共同拥有具有一个保守的蛋白基序W/Y-MDDIW,在拟南芥转录因子中,还有一组在拟南芥花器官中特异表达的转录因子,也含有这个保守基序,这其中就包括先前报道过的AtMYB21、PsMYB26、AmMYB305和AmMYB340等转录因子。我们利用酵母单杂交系统研究了AtMYB59和AtMYB21的转录激活活性,发现虽然W/Y-MDDIW这个保守的基序本身不能激活报告基因的表达,但是它可以极大的促进临近区域的转录激活活性。 我们对AtMYB59和AtMYB48的GUS转基因植物幼苗进行光暗处理,结果表明,AtMYB59和AtMYB48的表达均受到光的调节,且两者在黑暗中有较高的表达量,说明光对这两个基因的表达具有抑制作用,进一步详细地对上述转基因幼苗进行光下与黑暗定时处理,经GUS染色分析,AtMYB59和AtMYB48在转基因植物幼苗子叶和下胚轴中的表达受到光的调节,但在根中则呈组成型表达模式。除白光外,蓝光、红光、远红光等不同波长光对上述两个基因的表达也具有调控作用。AtMYB59的表达还受到拟南芥光形态建成正向调控因子HY5的抑制,由于在AtMYB59的启动子区域含有一个典型的可与HY5结合的位点G-box,对此用酵母单杂交的方法,初步检验AtMYB59的启动子是否具有直接结合HY5的能力。
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