牛卵泡发育相关基因表达的研究

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牛属于单胎动物,在一般情况下一个发情周期卵巢内只有一个成熟卵泡释放卵子,大量发育的卵泡在其发生过程中闭锁而不能排卵,限制了养牛业的快速发展。卵母细胞本身在内分泌激素的调控下有序的生长、发育,相关的基因在不同的时空准确表达。一些可能的因子(促性腺激素,生长因子,c-kit)已经有人研究过,但是抑制卵泡生长发育的机制我们知道的仍然很少。本试验以牛卵泡为研究对象,利用深度测序技术筛选出10个与卵泡发育相关的基因,进一步通过qRT-PCR技术对这10个基因在另一时期加以研究,旨在探讨其与母牛繁殖性能的关系,为进一步研究母牛繁殖方面的调控提供理论依据。本试验的研究结果及结论如下:1.通过深度测序技术对牛ODF1和PDF1颗粒细胞转录组数据进行了分析,分别获得了43,708,132和44,082,301个"clean reads"。在这两个文库中,统计得到了719个表达量相对较高的基因,并且还获得了83个差异表达基因,其中41个下调基因,42个上调基因。通过功能筛选,发现10个基因在牛卵泡发育过程中可能起到关键作用。2.荧光定量PCR结果表明:MAPK13和CPXM1在从属卵泡颗粒细胞中的表达量极显著高于优势卵泡(P<0.01),ARID4B在从属卵泡中的表达量显著高于优势卵泡(P<0.05);PRSS23和CYP19A1在优势卵泡中的表达量极显著高于从属卵泡(P<0.01),PRSS35和NOTCH1在优势卵泡中的表达量显著高于从属卵泡(P<0.05); PPP2R2A, SPOCK2和PTGFR在优势卵泡和从属卵泡中的表达量不存在显著差异。3. MAPK13, CPXM1和ARID4B在卵泡发育过程中起抑制作用,而PRSS23, CYP19A1, PRSS35和NOTCH1在牛卵泡发育过程中起促进作用。
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