木聚糖是植物细胞壁的重要组成成分，动物难以消化利用。木聚糖酶（EC3.2.1.x）是一类能够将木聚糖水解成寡糖或单糖的糖苷水解酶类，其中β-1,4-D-木聚糖酶（EC3.2.1.8）是该酶系中的关键酶，负责水解木聚糖的骨架结构，在饲料、造纸、纺织、食品、乙醇生产中具有重要的作用。枯草芽孢杆菌表达系统是公认的食品级表达宿主菌，具有遗传背景研究清楚、无致病性、可分泌目的蛋白质等诸多优势，已经成为仅次于大肠杆菌的第二大表达系统。目前所使用的枯草芽孢杆菌表达载体多为诱导型，即在加入某特定的诱导物后开始大量表达目的基因。但使用的诱导型启动子通常存在以下几种缺点：（1）转录强度低；（2）诱导物价格昂贵；（3）诱导物对宿主细胞有毒害作用。前人研究表明，在应激条件下，枯草芽孢杆菌PgsiB启动子所引导基因的表达水平较正常条件下有极大的提高。本研究以实验室前期筛选获得的短小芽孢杆菌BYG5-20N的耐碱性木聚糖酶基因（xynA）作为目的基因，将其置于启动子PgsiB的引导之下，构建应激处理诱导的木聚糖酶基因表达载体，并优化其应激处理条件。随后，又通过使用不同的枯草芽孢杆菌信号肽代替该木聚糖酶自身的信号肽，研究信号肽对应激条件下木聚糖酶表达和分泌的影响。（1）利用设计的引物从短小芽孢杆菌BYG5-20N基因组中PCR扩增耐碱性木聚糖酶基因xynA；从原养型枯草芽孢杆菌1A747菌株基因组中PCR扩增启动子PgsiB。将这两个基因分别连接至实验室前期构建的大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭表达载体上，成功构建新的重组载体pBXS，并转化枯草芽孢杆菌WB700菌株，获得重组菌BXS-W。当菌株BXS-W生长至对数生长期中期时，对其分别施加热应激、乙醇应激、盐应激、氧化应激和缺氧应激等五种应激处理。结果表明，与对照组相比，各应激处理组均能极显著提高木聚糖酶表达量，其中乙醇应激处理组极显著高于其他处理组。（2）以热应激、乙醇应激和盐应激为应激处理条件，进行全面试验，寻找较佳的应激条件以尽可能提高木聚糖酶的表达量。结果表明，当生长对数生长期中期的重组菌BXS-W处于2%乙醇+2%盐+45℃培养条件时，木聚糖酶活性可以达到最大值，为30.89U/ml。（3）信号肽对蛋白质前体的稳定性和成熟起到至关重要的作用。试验中利用枯草芽孢杆菌的6条信号肽取代该木聚糖酶基因自身的信号肽后，对其施加2%乙醇+2%盐+45℃的应激处理。结果显示，不同的信号肽对木聚糖酶表达量有一定的影响。PhoB、PhrC和AbaA信号肽能显著提高木聚糖酶的表达量，SacC和DacB信号肽对木聚糖酶的表达无影响，而WapA信号肽则降低了木聚糖酶的表达量。