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坛紫菜(Pyropia haitanensis)是中国南方沿海的一种重要的大型经济海藻。近年来,高温烂苗和种质退化等问题严重制约着坛紫菜养殖业的健康发展。因此,研究坛紫菜的抗逆机制,对选育具有优良性状的新品种具有十分重要的意义。本研究以坛紫菜野生型品系和耐高温型品系Z-61为材料,测定了坛紫菜紫外吸收物质在不同逆境胁迫条件下的含量变化,并克隆了坛紫菜紫外吸收物质合成相关基因的全长序列,并进一步从基因表达水平分析了坛紫菜紫外吸收物质对高温、失水、高光等逆境胁迫条件的响应,以及在坛紫菜不同世代间的表达水平差异,旨在为坛紫菜的良种选育以及基因工程研究提供基础。主要结果如下: 1.通过生理指标测定研究了不同胁迫条件下坛紫菜紫外吸收物质的含量变化,结果显示高温、失水和高光胁迫下细胞内紫外吸收物质含量的变化情况并不一致;藻蓝蛋白在高温、失水胁迫条件下没有发生显著变化,在高光胁迫下显著降低,而作为主要紫外吸收物质的MAAs在多种胁迫条件下含量均显著增加。坛紫菜不同生活史世代间的比较显示,藻蓝蛋白和MAAs的含量在叶状体世代中均显著高于丝状体世代。 2.采用普通PCR和RACE扩增相结合的方法,克隆获得了两条MAAs合成酶相关基因的全长序列,分别命名为PharoB-1、PharoB-2,其中PharoB-1基因含有aroB和o-mt两个编码结构域;同时,克隆获得了两条与坛紫菜海藻多糖合成相关基因的全长序列,分别命笔为Phglugp、Phgalt。 3.采用实时荧光定量PCR技术(qPCR)分析了4条基因在高温(29℃),失水以及高光胁迫下的表达情况,结果表明,与MAAs合成相关的基因在高温、失水、高光胁迫下均上调表达;与海藻多糖合成相关的基因在高温、失水胁迫下上调表达,但在高光胁迫下下调表达,说明坛紫菜紫外吸收物质对不同逆境胁迫条件的响应并不一致。不同生活史世代间,四条与坛紫菜紫外吸收物质合成相关基因的表达水平在叶状体世代均要显著高于丝状体世代,与坛紫菜不同世代间紫外吸收物质的含量差异一致,这种差异可能与坛紫菜不同世代的栖息环境和代谢情况直接相关。