背景:免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia,ITP)为儿童常见免疫性疾病。我们前期研究发现有较高比例的抗核仁抗体(Antinucleolar antibody,AnoA)阳性的儿童被诊断为ITP。Ano A在许多疾病发病进程中发挥重要作用,然而尚未见报道关于AnoA及其靶抗原分子在ITP中的作用机制。目的:筛选及鉴定AnoA阳性ITP患儿血清中AnoA识别的靶抗原。方法:利用HEP-2细胞系建立细胞固定-抗体结合-抗体洗脱-抗体中和体系以纯化患儿血清中AnoA。利用蛋白免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)和质谱分析法筛选与过ITP患儿血清中Ano A结合可能的靶抗原。通过质粒过表达和细胞免疫荧光鉴定靶抗原。结果:成功纯化ITP患儿血清中AnoA。核仁素(Nucleolin,NCL)、角蛋白II型细胞骨架1(Keratin type II cytoskeletal 1,KRT1)、角蛋白II型表皮细胞骨架2(Keratin type II cytoskeletal 2 epidermal,KRT2)、角蛋白I型细胞骨架10(Keratin type I cytoskeletal 10,KRT10)等蛋白可能为ITP患儿血清中AnoA结合的靶抗原。经鉴定其中NCL可能不是与ITP患儿血清中AnoA结合的靶抗原。KRT1、KRT2、KRT10等蛋白的作用待进一步验证。结论:本研究为ITP患儿血清中抗核仁抗体靶抗原的筛选鉴定提供有效方法,可进一步深化我们对ITP发病机制的认识。