促进植物生长的根围细菌筛选及ACC脱氨基酶基因的克隆

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本研究从内蒙古、山东、云南、河南等地的不同地区的不同作物的根部采集土样,采用浓度梯度方法分离细菌,然后用生物学方法筛选到促进植物生长的目的菌株ZX-7和ZX-9,用PCR介导的方法筛选含有1-氨基环丙烷-1-羧酸盐基因的目的菌株MX01和LG。菌株MX01和LG分离自山东小麦根围土壤中。2株细菌均可产生多种抗菌物质,如氢氰酸、嗜铁素、蛋白酶、但是LG不产生2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-DAPG),而MX01可以产生。平板对峙测定表明2株细菌立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)等多种植物病原真菌和细菌具有明显的拮抗作用。温室生测表明MX01对番茄青枯病和小麦全蚀病等土传病害具有较高防效而LG相对较弱。本研究通过16S rDNA序列同源性分析及生理生化测定将MX01株菌鉴定为荧光假单胞杆菌生物型Ⅱ(Pseudomonas fluorescens biovarⅡ),将LG菌株鉴定为荧光假单胞杆菌生物型Ⅳ(Pseudomonas fluorescens biovarⅣ)。为了探索促生菌主要促生因子的作用机制,本研究对菌株MX01的ACC脱氨酶基因进行了克隆和初步研究。其次,构建菌株MX01的高效基因组文库,使用PCR介导的方法从菌株MX01的基因组文库中克隆ACC脱氨基酶基因。
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