绵毛优若藜是原产美洲大陆的一种沙漠常绿灌木，是荒漠牧场冬季和春季的重要灌木饲草，近年来已在我国西北成功引种。绵毛优若藜的恶劣环境适应性极强，可在零下30℃、年降雨量为70—500mm、pH值为7．0—9．0的逆境中生长，具有极强的抗冻、抗干旱、耐高温、耐盐碱、耐贫瘠、耐沙埋等优点，拥有宝贵的抗逆性基因资源。因此，本文开展绵毛优若藜冷胁迫的均一化全长cDNA文库构建，进行大规模的随机测序，并对表达基因进行EST分析与生物信息学注释，获取冷胁迫抗逆基因资源信息，有利于解析荒漠常绿灌木的抗冻分子机制，为我国抗寒基因工程和转基因利用提供理论依据和物质基础。获得了以下主要结果：　　 (1)采用Creator SMART技术与DSN相结合方法，构建了绵毛优若藜冷胁迫均一化全长cDNA文库，文库的库容量为1．4×106克隆，插入片段的大小基本上在0．25—3kb之间，平均长度大于1 kb，且文库重组率为100％，全长率为46．3％，完全达到了高质量的全长cDNA文库的建库要求。　　 (2)随机挑取1248个克隆进行测序，成功测序1060条并构成绵毛优若藜冷胁迫的EST库。去除空载体和低质量的ESTs后，获得高质量ESTs为1041条，最短序列为100bp，最长为681bp，平均长度为551bp。　　 (3)对1041条高质量EST库进行组装拼接后，获得1009条Unigenes，其中重叠群Contigs为60个，平均长度为656bp，最短序列为307bp，最长序列为1100bp。1009条Unigenes序列，长度跨度从100bp至1100bp，平均长度为558bp，低丰度基因Singlets(仅含一条EST)为978条，占总数的96．93％，表明均一化效果和文库质量极高。　　 (4)对获得的1009条Unigenes进行ORF预测，得到946条ORF，序列长度最短为102bp，最长为981bp，序列平均长度为373bp。　　 (5)对1009条Unigenes序列进行进行Blastn—Nt同源性分析，529条序列与已知序列有同源特征，占总数的52．43％，其中为推测功能基因的有312条，占总数的30．92％，未找到序列同源性的Unigenes序列有480条，占总数的47．57％。　　 (6)对1009条Unigenes序列进行进行Blastx—Nr同源性分析，740条序列与已知序列有同源特征，占总数的73．34％，其中543条序列为推测功能基因，占总数的53．16％，未找到同源序列的有269条，占总数的26．66％。　　 (7)对1009条Unigene序列进行Blast—COG分析，获得注释序列240条，占总数的23．79％。对Blast结果进行功能分类，得到22类：General function predictiononly; Posttranslational modification，protein turnover，chaperones; Energy productionand conversion; Amino acid transport and metabolism; Carbohydrate transport andmetabolism; Translation，ribosomal structure and biogenesis; Transcription; Lipidtransport and metabolism; Coenzyme transport and metabolism： Inorganic ion transportand metabolism; Function unknown; Replication，recombination and repair; Secondarymetabolites biosynthesis; transport and catabolism; Cell wall/membrane/envelopebiogenesis; Signal transduction mechanisms; Defense mechanisms; RNA processing andmodification; Nucleotide transport and metabolism; Intracellular trafficking，secretion，and vesicular transport; Chromatin structure and dynamics： Cell cycle control，celldivision，chromosome partitioning; Nuclear structure。