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我国盐渍化土壤面积超过9000万公顷,大量土地荒芜,因此如何开发和利用大面积的盐渍土或盐渍化土地,不仅是我国增加农业可利用土地资源的需要,也是改善生态环境、增加绿色植被、提高森林覆盖率的需要.现代生物技术的发展为培育耐盐的作物品种提供了新方法和途径,已经成为改良盐碱地经济而有效的手段.紫叶李(Prunus cerasifera Ehrh.f.atropupurea Rehd.)属蔷薇科、李属植物,是樱李(P.cerasifera)的变种,原产亚洲南部.紫叶李以叶色而闻名,红叶终年可观赏,但由于其耐盐抗旱性较差,严重限制了其分布和利用.为此,本研究以紫叶李优良单株的嫩枝茎段为外植体,建立组培再生体系,进行农杆菌介导的甜菜碱醛脱氢酶基因转化的研究,以期获得抗盐性较高的新品系.据国内外资料显示,对紫叶李基因转化受体系统及基因转化体系的研究均尚属首次,为以后的研究试验及生产实践打下基础.其主要研究结果如下:1.转化受体体系的建立.丛生芽一步法诱导途径中,以芽尖为外植体,在MS+6-BA2.0 mg·L<-1>+IBA0.3 mg·L<-1>+蔗糖30 g·L<-1>培养基上40天后,芽的增殖系数最高可达到15.3,且无需暗培养;丛生芽两步法诱导途径中,以茎段为外植体,愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA2.0 mg·L<-1>+IBA 1.0 mg·L<-1>+蔗糖30 g.L<-1>,愈伤组织的诱导率可高达80﹪以上,芽的分化培养基为MS+6-BA 4.0 mg·L<-1>+IBA 0.3 mg·L<-1>+蔗糖30 g.L<-1>,平均每块愈伤组织分化芽数可达9.3个.根的诱导培养基是1/2MS+IBA 1.0 mg·L<-1>+蔗糖20 g.L<-1>,生根率可达100﹪.选取健壮幼苗移栽,并经驯化炼苗15~20天后,大田成活率可达90﹪以上.2.BADH基因转化体系的建立.建立了农杆菌介导的紫叶李高效遗传转化体系.最佳转化外植体为长0.5cm左右的茎段;最适脱菌的抗菌素类型及浓度为头孢霉素(Cef)400 mg·L<-1>;乙酰丁香酮(AS)的最适浓度为10 mg·L<-1>,活化培养基与共培培养基同时加入效果最佳;农杆菌活化培养基为2/3MS+1/3YEB;适宜的菌液浓度OD<,600>值为0.5左右;共培培养基的最适pH值为5.8;最佳预培养时间为3天;共培养的最适时间为3天;侵染时间为8~10分钟;最佳侵染方式是将茎段浸泡在菌液中摇动培养;紫叶李对Kan较为敏感,本试验采用了分级分步筛选方法,经过90天的抗性选择,共获得8株抗卡那酶素的植株.