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本论文通过诱变育种得到万古霉素（Vancomycin）高产菌株东方拟无枝酸菌Amycolatopsis Orientalis-29,并对其发酵条件进行了优化,同时建立了万古霉素的检测方法。使用紫外线对东方拟无枝酸菌Amycolatopsis Orientalis进行诱变处理,利用链霉素抗性筛选法进行初筛,最终得到高产菌株AO-29。在此基础上,优化了高产菌株AO-29的培养工艺和发酵培养基,提高了万古霉素的产量。 分别对高效液相色谱法和二剂量管碟法测定万古霉素的各项参数进行了研究,最终选择高效液相色谱法（HPLC）作为检测万古霉素产量的方法。采用RP-HPLC法,色谱柱选用Phenomenex prodigy 5 μ ODS3 100A(250×4.60mm,5μm柱,以三乙胺缓冲液（磷酸调节pH3.3）:乙腈:四氢呋喃=92:7:1为流动相,流速为1.5mL.min-1,检测波长为216nm。在该色谱条件下,在80μg.mL-1～600μg·mL-1浓度范围内有良好的线性关系。 利用琼脂块法对A.Orientalis-1进行纯化,选择了发酵性能较好的4号菌株作为出发菌株,摇瓶产量0.794g/L。 以东方拟无枝酸菌A.Orientalis-4为出发菌株,经紫外线诱变处理,筛选链霉素抗性突变株,从中获得万古霉素高产变株AO-29,其发酵效价较出发菌株提高167%。传代实验表明该变株的高产性能遗传特性较稳定。 通过对发酵培养基和各项参数的优化,确定最佳培养基方案和发酵条件:采用牛肉膏18g/L,棉籽饼粉12g/L,蔗糖26g/L,麦芽糖38g/L,磷酸二氢钾0.005%,硝酸钾0.6%,氯化镁0.03%,发酵培养基初始pH值7.1,接种龄48h,接种量7%,摇床转速170r/min,装液量为25mL,培养温度为28℃,在36h时添加0.2%酪氨酸。万古霉素的产量达到3.66g/L。