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用杂交瘤技术获得144株抗IBDV单克隆抗体,应用协同ELISA技术从中筛选出27株针对不同抗原决定簇的单克隆抗体。这些单克隆抗体都只对病毒多肽的VP2反应。 1.用这些单克隆抗体,发现不同来源的36株IBDV存在抗原差异性。 2.利用其中的M57、L122和M110三株单克降抗体可将所试病毒分为B、C两组。B组包括了所有的强毒,利用其他单克隆抗体又将该组分为6个小组,这些单克隆抗体所识别的位点的区域性分布在小组间有明显的差别。C组包括所有试验的中、弱疫苗毒,利用同样的方法,可将该组分为5个小组。 3.在27株单克隆抗体中,有9株是针对Ⅰ型病毒共同抗原决定簇的。其中M110在单克隆抗体的IFA反应最强。M57仪针对强毒特异性位点,L122针对弱毒特异性位点。强毒在适应CEF的过程中发生了M57位点的丢失,适应鸡胚的疫苗毒株在适应CEF过程中也发生了单克隆抗体位点的丢失。 4.用抗Ⅰ型IBDV的型特异性中和性单克隆抗体IB1致敏醛化的绵羊红血球,建立了反向间接血凝试验(RPHA)及反向间接血凝抑制试验(RPHI)。 5.RPHA检测IBDV的敏感度是AGP的256倍,与夹心ELISA相当;RPHI监测IBDV抗体的敏感度是AGP的256倍,与夹心阻断ELISA相当,RPHI与中和试验的相关系数为0.9808。 6.用RPHI测定雏鸡IBD的被动免疫PD50抗体水平为3.65,主动免疫PD50抗体水平为1.46。 7.测得雏鸡IBD母源抗体的消长规律是:1-3日龄抗体升高,随后开始下降,25日龄时消失。不同水平母源抗体的变化相似。 8.应用RPHI作为检测手段,发现种鸡场的种鸡无论有无接种疫苗,都带有程度不同的IBD抗体,不同鸡场之间差异显著,临床IBD发病鸡的血清抗体都低于免疫临界线,雏鸡在1周龄接种IBD灭活疫苗,可获得有效保护,开放式饲养的鸡群在后期有抗体大幅回升现象。 9.种鸡场应用RPHI检测抗体水平确定雏鸡的IBD免疫程序,可显著降低IBD的摘要临床发病率。关键词:传染性法氏囊病抗原性结构蛋白单克隆抗体反向间接血凝抑制试验