RNA用于体液鉴别的方法学建立及其法医学应用研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:hulala
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的为了对犯罪现场体液斑迹同时进行组织来源和个体识别的鉴定,建立一种准确、灵敏、快速的新方法。本文从基因表达的组织特异性入手,筛选出包括外周血、月经血、精液、阴道分泌物、唾液在内的常见体液特异性的mRNA标识,通过RNA判断体液来源以及DNA进行个体识别。方法根据实验要求,分别收集外周血、月经血、精液、阴道分泌物、唾液样本;比较并确立同时提取RNA和DNA的方法;选取了用于体液组织来源识别的7对引物,扩增产物在300bp以下,片段长度相似则采用不同荧光标记用以区分,统一了扩增条件,使7对引物可以在相同参数下扩增,用毛细管凝胶电泳法对RNA逆转录扩增产物和DNA扩增产物进行检验;应用所建立的方法分别通过对外周血、月经血、精液、唾液、阴道分泌物进行验证。结果1确定采用TRIzol法进行RNA和DNA的同时提取。2根据目标样本的序列,筛选多对引物,探索优化扩增体系,使扩增条件能够同时满足多对引物的需要。3对外周血、月经血、精液、阴道分泌物、唾液样本进行验证,均得到可靠结果。4五种体液除了均表达管家基因18S、GAPDH外,外周血表达SPTB;月经血表达MMP-7、SPTB、HBD-1;精液表达PRM-2;阴道分泌物表达HBD-1;唾液表达STATH。结论1本课题所建立的是一种对体液判别有效、实用的方法。2根据RNA在不同类型、功能的细胞或组织中的表达模式存在差异,确立通过检测RNA表达水平来进行体液组织来源鉴别的方法。提取RNA进行组织来源鉴定的同时进行DNA个体识别的检验。3采用RNA作为研究目标进行体液识别的标识,为此研究领域提供了一个新的思路。
其他文献
目的1.建立呋喃丹的死后分布、保存检材和埋葬尸体(犬)中的分解动力学研究动物模型;2.研究呋喃丹在大鼠、犬体内的死后分布以及其在保存检材、埋葬尸体(犬)中的分解动力学规律,为
本文针对微波实验教学中,反射式速调管工作原理难以理解,影响实验正常进行的困难,对反射式速调管中电子的运动进行了计算机图形模拟.通过在模拟程序中对速调管反射极电压的改
高校中开设Linux操作系统公选课可以拓展非计算机专业学生的计算机基础知识,基于Vmware虚拟机的Linux操作系统公选课综合实验教学环境的实现,使得学生通过上机实验环节掌握所学
户籍制度作为一项基本社会制度,本来是为社会的和谐、稳定、健康、有序发展服务的,但传统户籍制度人为地把本来生而平等的人分成了不同的等级,使城乡之间形成了不可跨越的鸿沟,城
《湖心亭看雪》是明末清初文学家张岱的代表作,文章以精炼的笔墨,记叙了作者湖心亭看雪的经过,描绘了所看到的幽静深远、洁白广阔的雪景图,表现了作者淡淡的愁绪及对人生渺茫
目的:99mTc-GSASPECT显像是一种新型核医学影像检查方法,可以弥补MRI、CT、超声等的不足,显示肝脏肿瘤拟手术患者残余肝脏的功能储备,从而指导手术决策。本研究从另一方面分析了