粪产碱杆菌JF101同时降解苯酚与氰化钾的研究

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苯酚与氰化物是剧毒物质,对菌株有显著的抑制毒害作用,焦化厂等行业排放的工业废水中常常含有这两种物质,导致生物法处理此类废水非常困难。本研究主要对筛选获得的一株粪产碱杆菌JF101同时降解苯酚和无机氰化物的特性及其机制进行了初步研究,发现该菌株不仅能够同时降解苯酚和氰化钾,而且还具有良好的耐盐性,为常规酚氰废水或者含盐酚氰废水的生物处理奠定了基础。本论文首先考察了菌株JF101降解苯酚与氰化钾的特性。结果表明,菌株JF101在苯酚单底物体系中,200、400、600 mg/L的苯酚完全降解所需时间分别为30 h,96 h,176 h;当加入氰化钾使之达到100 mg/L时,苯酚降解时间缩短为22 h,40 h,50 h,可见氰化钾的存在促进了苯酚的降解。HPLC跟踪苯酚降解产物,可知此菌株的苯酚降解产物有邻苯二酚,顺-顺粘糠酸,推断其降解途径为o-路径。而氰化钾的降解产物为甲酸、甲酰胺和氨。测定盐浓度在0~6%范围内菌株生长以及降解苯酚的情况,发现菌株能够耐受6%Na Cl的高盐浓度生长;菌株对苯酚的降解活力在3%的盐浓度下达到最高,为5.52 mg(L·h·OD600)-1,盐浓度升至6%时,菌株对苯酚的降解活力下降,但仍能保持23%的降解活力。认为高盐度下会抑制微生物酶活,也可能出现产物抑制现象,导致活性下降。从酶降解、体系p H变化、降解产物等方面研究了氰化钾对菌株JF101促进苯酚降解的原因。结果表明,超声破碎使得降氰酶和降酚酶较易失活,酶液对底物的降解能力均达不到用完整细胞降解的效果,当加入氰化物后,降酚酶活受到抑制,导致苯酚降解率降低,“促进作用”只有在完整细胞中才能体现。静息细胞将氰化钾降解完全后,体系p H值由8.0降低至6.9,但是不影响菌株对苯酚的降解。发现菌株可以利用氰化物的降解产物甲酰胺、甲酸进行生长,并且通过不同时间段加入氰化物,发现氰化钾对苯酚的促进作用发生在苯酚降解的停滞期,在降停滞期之前加入氰化钾可以缩短苯酚降解的停滞期时间,而在停滞期之后加入氰化钾则对苯酚降解没有促进作用,认为菌株通过降解氰化钾而获得C、N源进而促进苯酚的降解,说明菌株通过共代谢氰化物加速了苯酚的降解。推测共代谢是加快菌株降解苯酚的原因之一。
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