益气活血解毒方药对Lewis肺癌小鼠生物学行为影响的实验研究

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肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,半个世纪以来原发性肺癌发病率和死亡率在世界许多国家及地区都显著上升。据不完全统计,肺癌在我国多数大城市的发病居所有恶性肿瘤的第一或第二位。在治疗方面,虽通过手术、化疗、放疗可以取得一定的疗效,但任何单一疗法均存在局限性和毒副作用。为延长患者生存期,改善生存质量,中医药治疗肺癌已在临床实践中日益显示出优势。 现代医学目前认为,肿瘤的发生是由多基因相互协同作用的癌变过程,是由细胞增殖过度、分化异常和细胞死亡比例来调节的。随着细胞凋亡概念的引入,使人们有机会从另一个角度——凋亡受抑,细胞死亡不足来审视肿瘤的发生。凋亡不同与一般坏死,是一种有特征形态改变的细胞死亡形式,它的失调与多种疾病(包括肿瘤)有关,很多人类肿瘤均有凋亡能力的降低,两者呈负相关。近年的研究表明,很多抗癌药是通过诱导肿瘤凋亡来发挥作用的。诱发肿瘤细胞凋亡是进行肿瘤治疗的新思路。 肿瘤血管是肿瘤赖以生存的物质基础,肿瘤自身的发展以肿瘤血管生成为前提,随着肿瘤血管的增加,肿瘤也迅速发展。肿瘤血管生成不仅为肿瘤组织的生长提供营养及气体交换,同时也成为肿瘤细胞转移的最直接的门户。如果没有新生血管形成来供应营养,肿瘤在达到1~2mm的直径或厚度后(约107个细胞)将不再增大。因此诱导血管生成能力是恶性肿瘤生长、浸润与转移的前提之一。而血管生成强度即组织切片中微血管密度或微血管计数是判断肺癌生物学行为的有效指标。 益气活血解毒方药对肺癌的治疗有较好的疗效,但对肺癌光、电镜技术观察肺癌的形态学变化和光镜酶细胞化学染色法观察酶活性的改变及诱导细胞凋亡未见报道。本实验应用HE和光镜酶细胞化学染色法、电镜技术观察益气活血解毒方药对小鼠Lewis肺癌的形态学变化和酶活性的改变。C57BL\6小鼠造成肺癌模型,瘤细胞接种24h后开始灌胃给药,每天一次,连续15天。盐水对照组灌胃为生理盐水,0.5ml/只,化疗组腹腔注射顺铂,1mg/Kg/只,中药组灌胃为中药汤剂0.5ml/只。停药24h后取材。 应用光镜-酶细胞化学染色法,标记细胞质膜标志酶Mg2+-ATPase与内质网标志酶G-6-Pase。镜下见与正常组比较,施加处理因素组两种酶反应颗粒变小,数量减少,密度减低。酶活性施加处理因素组与正常组比较,P<0.05,差异性显著。提示益气活血解毒方药降低Mg2+-ATPase、G-6-Pase的酶活性。光镜下可见到中药组微血管数明显减少,电镜下可见到细胞凋亡现象。 通过本试验可得出如下结论:①益气活血解毒方药治疗肺癌有抑制肿瘤生长的作用。②益气活血解毒方药具有诱导肺癌细胞凋亡作用。③益气活血解毒方药降低肺癌细胞质膜标志酶Mg2+-ATPase及内质网标志酶G-6-Pase活性。④益气活血解毒方药降低肺癌微血管密度。说明益气活血解毒方药治疗肺癌能抑制肿瘤的生长、转移,显示良好的抑癌作用。
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