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第一部分五味消毒饮对IgA肾病大鼠NF-κB信号通路的实验研究目的:观察五味消毒饮对IgA肾病（IgAN）大鼠核转录因子-κB（NF-κB）信号通路的影响,并探讨其治疗IgA肾病的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、贝那普利组(10mg·kg·d-1)、五味消毒饮组(2.75g·kg·d-1),每组10只。采用牛血清白蛋白（BSA）灌胃,四氯化碳（CCl4）皮下注射以及脂多糖（LPS）尾静脉注射方法共9周建立IgAN大鼠模型,各组给予相应剂量的药物灌胃,对照组和模型组给予等量生理盐水,连续给药28d。检测大鼠24h尿蛋白（UTP）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、血清白蛋白（ALB）水平、酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）的含量,苏木精-伊红染色法（HE）、免疫荧光法及透射电镜观察肾脏病理改变,免疫组化法（IHC）、实时荧光定量PCR法（RT-PCR）及蛋白质印迹法（Western blot）分别检测肾组织中IL-6、IκB激酶β（IKKβ）、磷酸化IκB激酶β（p-IKKβ）、NF-κB抑制蛋白α（IκBα）、磷酸化NF-κB抑制蛋白α（p-IκBα）、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65（p-p65）的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠UTP水平显著升高（P＜0.01）,肾小球系膜细胞增生,系膜基质增多,系膜增厚,电子致密物沉积增多,大量IgA沉积于肾小球系膜区并呈现不规则颗粒及团块状分布;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著升高（P＜0.01）;肾组织中IL-6、IKKβ、p-IKKβ、IκBα、p-IκBα、NF-κB p65、p-p65的表达显著升高（P＜0.01）。与模型组比较,各给药组大鼠UTP水平显著降低（P＜0.05,P＜0.01）,肾组织损伤情况均有所减轻;血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著降低（P＜0.05,P＜0.01）;肾组织中IL-6、IKKβ、p-IKKβ,IκBα、p-IκBα、NF-κB p65、p-p65的表达显著降低（P＜0.05,P＜0.01）。各组间血肌酐、尿素氮及血清白蛋白相比无明显差异（P＞0.05）。小结:1通过BSA+CCl4+LPS联合方法建立IgAN大鼠模型,9周末大鼠出现明显尿蛋白增多及肾脏病理损伤,可见IgAN大鼠模型成功复制。2五味消毒饮对IgAN大鼠的肾脏病理损伤具有良性的干预作用,其可减少IgAN大鼠的尿蛋白,减轻肾脏的病理损伤。3 NF-κB参与了IgAN大鼠蛋白尿及肾脏损伤的发生发展。4五味消毒饮可以明显抑制NF-κB信号通路相关蛋白在肾组织中的高表达,并可抑制相关炎症因子在血清及肾组织中的过度分泌进而起到抑制炎症反应的作用。第二部分五味消毒饮含药血清对大鼠肾系膜细胞增殖、细胞外基质及NF-κB信号通路的影响目的:观察五味消毒饮含药血清对脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖、外基质及NF-κB信号通路的影响。方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞株分别予对照组、脂多糖组、贝那普利组、五味消毒饮低剂量组、五味消毒饮高剂量组干预24h。MTT法测定各组细胞增殖,ELISA法测定各组细胞培养上清液中的白细胞介素-1β（IL-1β）、细胞间黏附分子（ICAM-1）、纤连蛋白（FN）及层粘连蛋白（LN）的表达情况,RT-PCR法检测各组细胞IL-1β、FN、NF-κB p65 m RNA的表达。蛋白质印迹法（Western blot）检测系膜细胞中pIKKβ、p-IκBα、NF-κB p65蛋白的表达。结果:与对照组比较,脂多糖组细胞增殖显著增多,IL-1β、ICAM-1、FN、LN、p-IKKβ、p-IκBα、NF-κB p65的表达显著升高（P＜0.01）,与脂多糖组比较,治疗组细胞增殖显著降低,IL-1β、ICAM-1、FN、LN、p-IKKβ、p-IκBα、NF-κB p65的表达显著降低（P＜0.05,P＜0.01）。小结:1通过脂多糖刺激大鼠肾小球系膜细胞建立肾系膜细胞炎症模型,造模结束后肾系膜细胞出现明显细胞增殖及炎性损伤,可见肾系膜细胞炎症模型成功复制。2五味消毒饮含药血清对脂多糖诱导的大鼠肾系膜细胞的炎性损伤具有明显的干预作用,可减轻系膜细胞增殖,降低炎症细胞因子的过度释放,减少细胞外基质的过度分泌。3五味消毒饮含药血清可明显抑制NF-κB信号通路相关蛋白的高表达,抑制磷酸化,进而抑制了NF-κB在肾系膜细胞中的部分活化,这可能是该方剂降低蛋白尿,减少肾脏病理损伤的主要作用机制之一。结论:1通过BSA+CCl4+LPS联合方法建立IgAN大鼠模型,9周末大鼠出现明显尿蛋白增多及肾脏病理损伤,表明IgAN大鼠模型成功复制。通过脂多糖刺激大鼠肾小球系膜细胞建立肾系膜细胞炎症模型,造模结束后肾系膜细胞出现明显细胞增殖及炎性损伤,表明肾系膜细胞炎症模型成功复制。2五味消毒饮对IgAN大鼠的肾脏病理损伤具有良性的干预作用,其可降低IgAN大鼠的尿蛋白,减轻肾脏的病理损伤,抑制炎症因子的过度释放。3五味消毒饮可改善由脂多糖诱导的大鼠肾系膜细胞的炎性损伤,减轻系膜细胞增殖,降低炎症细胞因子的过度释放,减少细胞外基质的过度分泌。4根据体内与体外实验证实,五味消毒饮能明显抑制NF-κB信号通路相关蛋白的过度表达,进而抑制了NF-κB的激活,这可能是其降低蛋白尿,减少肾脏病理损伤的主要作用机制之一。