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目的:(1)研究封闭负压冲洗引流对糖尿病大鼠皮瓣修复中TGF-β1, TGF-β3表达的影响,探讨其可能的作用机制。(2)研究封闭负压冲洗引流在临床糖尿病足修复中的应用并研究其与传统的修复方法在保足率以及治疗时间等方面的差异。方法:1.封闭负压冲洗引流对糖尿病大鼠皮瓣修复中TGF-β1, TGF-β3表达的影响1.1糖尿病大鼠模型的制备实验大鼠禁食24h后一次性单剂量腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin, STZ)65mg/kg。5h后给予5%葡萄糖溶液饮用。次日尾部取血测血糖值大于10mmol/L表示造模成功。造模成功后实验组大鼠每两天测血糖1次,直至动物处死。1.2将造模成功的糖尿病大鼠随机分为实验组和对照组两组大鼠均在背部分离出约2cm×5cm的带蒂皮瓣。实验组给予持续封闭负压吸引。对照组给予生理盐水换药处理。1.3取材,固定分别在实验的3d,5d,7d,11d各取实验组同对照组动物处死,分离创面新鲜肉芽组织,用10%中性福尔马林固定备用。1.4实验观察在显微镜下观察实验组和对照组不同时相点的病理形态变化,采用免疫组化的方法测定各标本TGF-β1, TGF-β3的表达含量。2.封闭负压冲洗引流在临床糖尿病足修复中的应用研究将2006年至2008年我院治疗的82例糖尿病足坏疽患者(Wagner4,5级)设为单纯手术修复组。该组患者进行清创修复或小截肢手术,术后给予常规换药14日后拆线。将2009年至2011年6月我院治疗的91例糖尿病足坏疽患者(Wagner4,5级)设为联合负压组,该组患者手术联合封闭负压冲洗引流。持续负压引流6-7d,拆除负压引流后换药7天后拆线。比较两组患者保足率(修复或小截肢手术成功率)和治疗时间。结果:1.封闭负压冲洗引流对糖尿病大鼠皮瓣修复中TGF-β1, TGF-β3表达的影响在实验的病理观察中,3d时可见负压组对照组均有明显的单核细胞渗出,伴有成纤维细胞以及毛细血管增生。负压组较对照组毛细血管数量多且坏死组织较少。实验7天可见负压组肉芽组织生长好,成纤维细胞较之对照组数量多且毛细血管胚芽较多,两组差异明显。实验11d时两组均有大量肉芽组织和新生上皮组织。但负压组相比对照组新生上皮多且厚。实验结果显示在不同时相点中,对照组创面TGF-β1, TGF-β3的表达均低于实验组。对照组TGF-β1表达的峰值出现在第5天,实验组表达峰值出现在第7天。对照组TGF-β3表达的峰值出现在第3天,实验组表达峰值出现在第5天。2.封闭负压冲洗引流在临床糖尿病足修复中的应用研究单纯手术组82例患者中57例术后伤口愈合,25例术后伤口愈合不良,再次行截肢手术治疗,保足率为69.5%。平均治疗时间为43.1d。联合负压组91例患者中80例伤口愈合,11例愈合不良二次手术。保足率为87.9%。平均治疗时间为33.7d。联合负压组保足率高于单纯手术组且平均治疗时间低于单纯手术组(P<0.05)。结论封闭负压引流技术可以促进糖尿病创面修复手术的伤口愈合。临床修复手术加用封闭负压引流,可以提高严重糖尿病足修复或小截肢修复治疗的成功率,缩短住院治疗时间。动物实验显示封闭负压冲洗引流技术可以增加糖尿病大鼠皮瓣创面TGF-β1, TGF-β3的表达。封闭负压冲洗引流技术促进糖尿病创面愈合的机制可能与TGF-β1, TGF-β3的表达增加有关。