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目的:化疗是治疗肿瘤的主要方法之一,但是由于化疗药物自身的缺陷和对机体无选择性的杀伤,导致化疗药物不能彻底的清除肿瘤细胞。有研究显示,化疗的肿瘤患者普遍免疫力低下,有近半数的肿瘤患者在癌症侵袭或者器官衰竭前就死于感染。众所周知,抗瘤免疫的主要细胞是肿瘤抗原特异性T细胞。T细胞不仅作为肿瘤抗原特异性的T细胞,发挥杀伤肿瘤细胞的效应,而且还在机体对抗感染中也起到重要作用。T细胞要发挥作用,必须先被趋化到二级淋巴器官中的T细胞区,与同样被趋化的抗原递呈细胞相互作用,活化、增殖,进而进入外周器官发挥杀伤肿瘤或者抗感染效应。T细胞被趋化因子趋化进入二级淋巴器官的T细胞区这个过程也叫做归巢。因此T细胞归巢的质和量决定着机体免疫效应的质量,趋化足够量的T细胞归巢到二级淋巴器官是机体发挥免疫效应的基础。T细胞主要受到二级淋巴器官中gp38+CD31—的基质细胞———成纤维网状细胞(FRCs)分泌的趋化因子CCL21、CCL19的趋化,通常是CCL21在T细胞的归巢中发挥着主要作用。以往有研究表明,减少淋巴组织中趋化因子的平衡稳定的表达,会减少T细胞和DCs在T细胞区的相遇,从而削弱免疫反应强度。因此,我们课题组想研究化疗药物对二级淋巴器官有什么影响?对T细胞归巢有什么样的改变?在预实验中我们发现,化疗后小鼠脾脏T细胞被趋化到脾脏的数量减少,而这个现象的原因是脾脏基质细胞分泌的趋化因子的减少。为了更深入的研究T细胞及二级淋巴的基质细胞在化疗中受到的影响,我们选择了临床上治疗肺癌常用的顺铂、吉西他滨、5-FU三种化疗药物,通过建立小鼠化疗模型,研究化疗对二级淋巴器官的基质细胞及T细胞归巢的影响,阐明这三种药物对二级淋巴器官及免疫细胞的影响及可能的机制。方法:1.建立小鼠化疗模型,通过流式细胞技术、免疫荧光等技术观察小鼠T细胞在二级淋巴器官的归巢情况。2.通过免疫荧光、酶联吸附试验(Elisa)检测、RT-PCR等检测小鼠二级淋巴器官中趋化因子CCL21、CCL19的表达。3.结合小鼠脾脏基质细胞体外分离培养,通过流式细胞技术、免疫荧光技术检测其凋亡情况,明确化疗药物对脾脏基质细胞凋亡的作用。结果:1.化疗药物顺铂、吉西他滨、5-FU治疗后,小鼠脾脏基质细胞表达的CCL21明显降低,归巢的T细胞明显减少。2.化疗药物顺铂、吉西他滨、5-FU治疗后,小鼠淋巴结趋化的T细胞与对照组无明显差异。其分泌的趋化因子CCL21、CCL19无明显差异。3.化疗药物顺铂、吉西他滨、5-FU治疗使脾脏基质细胞凋亡增加,CCL21、CCL19分泌减少。结论:1.化疗药物顺铂、吉西他滨、5-FU治疗能通过降低趋化因子CCL21、CCL19,降低T细胞归巢到脾脏的数量。而3淋巴结无明显的影响。2.化疗药物顺铂、吉西他滨、5-FU使脾脏基质细胞凋亡增加从而降低脾脏CCL21、CCL19的分泌和T细胞的归巢。