金凤花茎中的二萜化合物及其生物活性研究

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金凤花Caesalpinia pulcherrima(L.)Sw,为豆科(Leguminosae)云实属(Caesalpinia)植物,以cassane二萜为特征性化学成分,具有抗炎、抗菌、抗病毒、镇痛、拒食和杀虫等广泛的生物活性。本文以云南产植物金凤花(Caesalpinia pulcherrima(L.)Sw.)的茎为研究对象,对其Cassane二萜成分及其抗神经炎活性、抗菌活性进行系统研究。通过硅胶、RP-C18、葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)和小孔树脂凝胶(MCI)等多种材料,并综合运用1D/2D NMR、HR-ESI-MS、IR、UV、ORD和CD等波谱手段以及X-单晶衍射从该植物茎中共分离鉴定不重复化合物43个。同时,对部分化合物进行抗神经炎、抗菌活性测试,结合细菌生长曲线的测定、细胞膜通透性实验和扫描电镜对细胞膜表面结构的观察,对活性突出的化合物做了初步的抑菌机制研究。从金凤花的茎中共分离鉴定43个化合物,包括28个cassane二萜类化合物、10个倍半萜类化合物和5个三萜类化合物,其中新化合物17个(pulcherritams I-T,1–15,caesalpulcherrins K-L,16–17),均为cassane二萜。抗神经炎活性测试表明,α,β-不饱和-γ-内酯型cassane二萜化合物7*、11*和27对LPS诱导的BV-2小胶质细胞NO的产生具有较强的抑制活性,IC50值分别为5.68±0.74μM,7.62±0.49μM和8.67±1.02μM,强于阳性对照槲皮素(IC50=11.50±1.0μM)。通过体外抗细菌活性测试发现,呋喃环型cassane二萜23对猕猴桃溃疡病菌(Pseudomonas syringae pv.Actinidae)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant staphylococcus aureus)均较为敏感,显示出较强的抑制活性,MIC值均为3.12μM,化合物24次之,MIC值均为6.25μM。此外,化合物19显著抑制Psa生长,MIC值为6.25μM,而化合物2*和8*对B.cereus和S.aureu的抑菌活性显著,MIC值均为6.25μM。通过对抗菌活性突出的化合物23进行抗菌作用机制研究,发现其抑菌机制可能是通过作用于B.cereus和Psa的细胞膜,破坏细菌的表面结构使菌体出现孔洞甚至破裂,从而达到抗菌效果。本文为筛选具有显著抗菌活性的先导化合物提供了研究方向,也为云实属植物的可持续开发利用奠定了理论基础及提供科学依据。
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