辛纳毒蛋白细胞毒性及热稳定性研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ya0000000000
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第一部分:辛纳毒蛋白和蓖麻毒蛋白对BA/F3β细胞毒性的比较研究.该文对辛纳毒蛋白的RNA N-糖苷酶活性及其细胞毒性进行了研究.并与蓖麻毒蛋白(ricin)进行了比较.结果表明辛纳毒蛋白的A-链与蓖麻毒蛋白的A-链对兔网织红细胞裂解液构成的蛋白质合成系统具有相近的蛋白质合成抑制作用(蛋白质合成能力被抑制一半时毒素的浓度,即半抑制剂量IC<,50>分别为8×10<-10>M和4×10<-10>M);但是,对于培养的BA/F3β细胞作的试验表明,辛纳毒蛋白的细胞毒性比蓖麻毒蛋白低得多(IC<,50>分别为1.1×10<-11>M和8×10<-14>M).为了说明细胞毒性的巨大差异是因为它们的B-链差异造成,我们纯化了辛纳毒蛋白和蓖麻毒蛋白的A-链和B-链,用二硫键交换反应制备了两个杂合蛋白,对它们的细胞毒性与两个天然毒蛋白进行了比较,结果表明辛纳毒蛋白A-链(CTA)和蓖麻毒蛋白B-链(RTB)构成的杂合蛋白(CTA-RTB)与天然蓖麻毒蛋白的细胞毒性相近;而由蓖麻毒素A-链(RTA)和辛纳毒蛋白B-链(CTB)构成的杂合蛋白(RTA-CTB)与天然辛纳毒蛋白的细胞毒性相近.第二部分:辛纳毒蛋白A-链热稳定性研究及其B-链介导的部分变性A-链的重折叠.第三部分:香樟树种子中"两性"超氧化物歧化酶的超螺旋DNA切割活性研究.
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