胃癌中PARP6与Survivin的表达及PARP6对BGC823细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

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目的:(1)明确胃癌组织及癌旁正常组织中PARP6与Survivin的表达情况;(2)探讨PARP6与Survivin在胃癌中的相关关系及两者的表达与胃癌的临床病理特征的相关性;(3)明确PARP6对胃癌细胞系BGC823的增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:(1)收集贵州省人民医院2016年9月至2017年9月胃癌术后石蜡标本65例,并随机选取10例癌旁非癌组织作为对照;采用免疫组织化学法检测PARP6和Survivin的表达强度,并分析PARP6、Survivin的表达水平与胃癌临床病理特征的相关性;(2)Western Blot分析正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)及胃癌细胞系(BGC823)中PARP6和Survivin的表达情况;(3)通过慢病毒转染建立稳定过表达、沉默PARP6的BGC823细胞系,采用Western Blot法检测过表达PARP6细胞系、沉默PARP6细胞系、空载质粒细胞系(对照组)中PARP6和Survivin的蛋白表达情况;(4)采用细胞增殖法(Cell Counting Kit-8,cck-8)检测过表达PARP6细胞系和沉默PARP6细胞系在第24h、48h和72h的细胞增殖活性;(5)通过细胞划痕实验、细胞迁移实验和侵袭实验分别比较过表达PARP6细胞系、沉默PARP6细胞系的迁移和侵袭能力的变化。结果:(1)免疫组化结果显示PARP6和Survivin在胃癌组织中的高表达率分别为86.2%(56/65)和92.3%(60/65),而两者在癌旁正常组织中全部为低表达(P﹤0.05);经χ~2检验表明,胃癌中PARP6和Survivin的表达均与患者年龄、性别、是否转移、TNM分期和分化程度均没有相关性(P﹥0.05);通过Spearman相关性分析(r=0.720,P﹤0.05)得知胃癌中PARP6与Survivin表达之间呈正相关。(2)Western Blot结果显示PARP6和Survivin在胃癌细胞系(BGC823)中的蛋白表达均高于正常胃黏膜上皮细胞(GES-1),均具有统计学意义(P﹤0.05);(3)与对照组相比,过表达PARP6细胞系中Survivin蛋白高表达,沉默PARP6细胞系中Survivin蛋白低表达(P﹤0.05);(4)细胞增殖检测显示,在24h、48h和72h时过表达PARP6细胞系的OD值明显高于对照组(P﹤0.05),而沉默PARP6细胞系的OD值明显低于对照组(P﹤0.05)。(5)细胞划痕实验表明过表达PARP6细胞系的迁移率明显高于对照组(P﹤0.05),而沉默PARP6细胞系的迁移率明显低于对照组(P﹤0.05);Transwell迁移实验和侵袭实验结果发现过表达PARP6细胞系穿过小室的细胞数明显高于对照组(P﹤0.05),而沉默PARP6细胞系穿过小室的细胞数明显低于对照组(P﹤0.05)。结论:(1)PARP6与Survivin在胃癌组织和胃癌细胞系中高表达,可能参与了胃癌的发生;(2)PARP6可能通过上调Survivin促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,参与胃癌的发展。
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