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目的:以电针疗法为干预手段,通过对胃、小肠、大肠的合穴及下合穴分别给予单独电针刺激,观察水通道蛋白AQP3及AQP3mRNA的表达,从而明确电针对功能性腹泻的合穴与下合穴之差异,为临床行使电针疗法,应用“合治内腑”理论医治功能性腹泻,提供实验理论依据,引导临床选穴。 方法:选取70只(SD)大鼠,雌雄分笼饲养各35只,随机分7组:正常对照组、模型组、足三里组、曲池组、小海组、下巨虚组、上巨虚组。建模方法为:每个大鼠模型的建模方法(除空白组)同时每天给予番泻叶煎剂,3ml/每只,每日1次,灌胃14天,空白组给予同一时间每天抓取、固定,连续观察14天,各组大鼠均正常饲养,至结束后的28天模型完成。造模成功后即刻进行电针干预,各组取穴及针刺深度均依据《实验针灸学》所提供的标准确定,采用韩氏电针仪进行电针干预,频率为15Hz,电流强度约为1.5mA(造成大鼠微动为度),每次针刺时间为20min,每日干预1次,10次为1疗程。造模期及电针干预期间,每天同时间收取大鼠粪便,记录其稀便率、稀便级,计算其稀便指数,在电针干预结束后,取大鼠空肠组织标本,加入RIPA裂解液后依据免疫印迹法(western bolt)的操作步骤,测定大鼠空肠水通道蛋白AQP3的含量;再取组织用PBS冲洗,依据RT-PCR步骤,经过分析得出AQP3mRNA的表达。 结果: 1.电针干预10天后,足三里组、下巨虚组和上巨虚组等三组穴位与模型组比较,功能性腹泻大鼠粪便性质都有较为明显的改善,以下巨虚组最为显著; 2.电针下巨虚组及足三里组大鼠,其AQP3及AQP3mRNA的表达升高,有统计学意义。 结论:电针干预下巨虚组优于其他组穴位;模型对照组大鼠空肠组织中AQP3含量明显降低,与空白组比较,有极显著性差异;电针干预各合穴组与模型对照组比较,下巨虚组、上巨虚组的空肠中AQP3含量明显升高,与模型对照组比较,有统计学意义;而电针小海穴组、曲池穴组与模型对照组比较,空肠中AQP3含量的变化,无统计学意义,验证了“合治内腑”经典理论,本经合穴与异经合穴,本腑合穴与下合穴之间的差异。