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本文以建立烟用料液高效液相指纹图谱为目的,对十家合作单位提供的200个样品做了前处理、分析方法、数据处理方面的研究,并分析了烟用香精香料中一类重要的致香物质——芳香类物质。在对液液萃取、冻干复溶、直接稀释三种前处理方法综合比较的基础上最终选用直接稀释的前处理方法。在实验方法的探索阶段采用内标法定量。香料样品成分复杂,选用了不同的内标试剂和检测波长。2、3、7、17、18号样品选用硝基苯内标,其余样品选用菲内标。5、7、13、17、20号料液样品检测波长为275nm;16号料液样品检测波长为265nm;其余料液样品检测波长为254nm。方法精密度实验相对保留时间(RRT)RSD低于0.19%,相对峰面积(RPA)RSD低于6.60%,。重复性实验RRT的RSD低于0.58%,RPA的RSD低于4.51%。考虑到料液样品组成复杂,且含有大量天然成分,部分组分以及溶剂有挥发性,料液样品在4℃下避光密封保存,分析检测同一个样品在一周前后的变化,测得RRT的RSD低于6.89%,RPA的RSD低于9.60%。指纹峰的定量采用2—甲基萘为外标试剂,工作曲线:y=24512x+127298,R~2=0.9964。实验选用Symmetry C18 4.6mm(ID)*250mm5μm色谱柱;流动相为A—乙腈(色谱纯)B—0.1%甲酸(色谱纯);进样量为15μL;柱温40℃;UV254检测;流量1mL/min;梯度条件:0~80min:100%B,80~99min:100A,99~100min:100%B。实验针对模拟配方、放置变化、不同批次等样品进行了大量实验,提取了详实的数字指纹图。芳环类物质的研究采用硝基苯作为内标,HPLC分析条件同内标法,测定了香兰素、乙基香兰素、肉桂酸、肉桂酸苄酯、大茴香醛五种芳香类物质在料液中的含量、加标回收率。工作曲线分别为:y=13098x+193680,R~2=0.9999;y=12544x+83758,R~2=0.9999;y=49868x+717351,R~2=0.9985;y=34254x+330037,R~2=0.9998;y=28020x+255897,R~2=0.9997,五种物质最小检测限分别为:13.8、16.5、3.4、0.6、8.1ug/g。测定结果具有较好的重现性,五次测定结果的RSD在0.21%-1.31%之间。标样回收率在100.6%~111.8%之间。