【摘 要】
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目的：从猪囊尾蚴cDNA中扩增出GP50编码基因，亚克隆至真核表达载体，利用所得的重组蛋白，为建立一种灵敏检测猪囊尾蚴感染的实验方法作准备。方法：设计并合成引物，从猪囊尾蚴cDNA文库
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目的：从猪囊尾蚴cDNA中扩增出GP50编码基因，亚克隆至真核表达载体，利用所得的重组蛋白，为建立一种灵敏检测猪囊尾蚴感染的实验方法作准备。方法：设计并合成引物，从猪囊尾蚴cDNA文库中PCR扩增GP50编码基因，通过与线性克隆载体pGEM-T连接，经酶切和PCR鉴定及DNA测序证实后，将目的基因亚克隆入双表达载体pBK-CMV，将获得的pBK-CMV-GP50阳性重组子转化宿主菌E．coli BL21，IPTG诱导表达，Western blot鉴定。结果：PCR法扩增出了一897bp左右的DNA片断，将重组质粒pGEM-T-GP50、pBK-CMV-GP50分别作BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切，均能得到一个大小与PCR扩增产物一致的插入片断，对插入片断的测序结果表明，GP50具有一个长度为897bp的完整开放阅读框(ORF)，编码298个氨基酸，理论分子量33kDa，与GenBank收录(编号为AY212945)的猪囊尾蚴GP50基因具有高度的同源性(99％)。表明GP50基因的克隆和亚克隆均获成功，用IPTG诱导带有重组质粒pBK-CMV-GP50的大肠杆菌，产物行SDS-PAGE，可得到一约36kDa融合蛋白，Western-blot法鉴定该蛋白能被猪囊尾蚴感染的人血清所识别。
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