钴胺素又称维生素B₁₂,在临床医学,饲料和食品等领域作为用于治疗和营养补充剂广泛使用。羟基钴胺素传统的生产方法是利用在生产出氰基钴胺素后,再用化学法合成羟基钴胺素。羟基钴胺素属于VB₁₂族（钴胺素）的一种,是氰钴胺素的更新替代产品。本研究首先是使用实验室保存的经过选育的费氏丙酸杆菌为出发菌株,通过丙酸压力筛选,得到了高产菌株WY-380,提高了维生素B₁₂和丙酸的产量。研究了脱氧腺苷钴胺素的动态连续光解合成羟基钴胺素的过程,对羟基钴胺素大孔树脂提取工艺进行了研究,建立了利用发酵产物腺苷钴胺素光解直接生产羟基钴胺素的生产工艺。此工艺替代传统的生产方法,减少了工艺的复杂性,增加生产的经济性,并且避免了生产过程中氰化物的使用。本论文主要的研究内容和结果如下:1、费氏丙酸杆菌耐酸菌株的筛选实验室保存的经过选育的菌株为出发菌株,采用丙酸压力筛选的方法,获得了一株耐30g/L丙酸的费氏丙酸杆菌WY-380。通过耐酸菌株的发酵工艺优化,在2L摇瓶发酵至84h时,加DMB转化48h,结束发酵。维生素B₁₂和丙酸的含量分别为23.2mg/L和38.3g/L,较出发菌株提高了81.25%和5%。2、脱氧腺苷钴胺素光解制备羟基钴胺素的工艺研究研究了不同条件下脱氧腺苷钴胺素的光解过程,建立了羟基钴胺素的制备工艺。静态实验结果表明,当紫外光强度为13000Lux时,22mg/L的脱氧腺苷钴胺素完全光解转化的时间为15min。采用连续式紫外光反应器进行动态光解实验,结果表明,当流速为40ml/min时,74.2mg/L及以下浓度的脱氧腺苷钴胺素可以实现完全光解。3、大孔树脂提取羟基钴胺素使用大孔树脂对光解得到的羟基钴胺素样品进行了提取工艺研究。以D-85、LX-1180、LX-1600、LX-100四种型号的树脂为实验材料进行静态吸附和解吸,筛选出了吸附量大、解吸率高D-85树脂。以此型号为实验材料进行动态吸附实验,对比了不同上样速率、样品pH、树脂预处理方法对其吸附量的影响,以及不同洗脱速率、洗脱液pH条件下其解吸率的差异,确定了羟基钴胺素的树脂提取工艺:采用D-85H型,样品pH4.0,2BV/h的上样速率,树脂的饱和吸附载量达到398.57mg/g;以pH2.0、60%的乙醇为洗脱液,1BV/h速率洗脱,解吸率为97.85%。利用该工艺,光解液经过树脂一次提取后,洗脱液中羟基钴胺素的浓度达到1219.2mg/L,为样品浓度的20.25倍,干燥后粗品中羟基钴胺素的含量为21.95%。此工艺操作简单,无污染,具有实用价值。