通过多重收缩微流控通道分析单细胞生物物理学特性鉴定胶质瘤细胞的研究

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目的:本课题通过设计特殊的含有多个收缩及舒张区域的微流控通道检测细胞的生物物理学特征,通过分析该特征来获得鉴定胶质瘤细胞的模型,旨在发现一种新的胶质瘤细胞检测方法。方法:本课题所设计的微流控通道含有一条通道包括连续的5个收缩域和6个舒张区,选择人源胶质瘤细胞株U87、U251和人源正常胶质细胞株HA1800作为研究对象,使用微流控通道对三种细胞进行处理,获得3株细胞在各个区域的速度、尺寸数据。根据获得数据制定细胞分类标准,验证分类标准并将具有分类效能的分类标准纳入到分类模型中。然后通过收集并培养原代胶质瘤细胞,获得细胞数据后对分类模型识别胶质瘤肿瘤细胞的能力进行验证。结果:我们获得了共计约300个细胞株细胞在微流控通道内的速度、尺寸信息,根据这些信息获得了5个分类标准,经过验证选取了其中4个标准纳入到分类模型中,经过二元logistics回归验证4个分类标准均具有检测胶质瘤细胞的能力,综合检测能力的AUC值达到0.947。然后通过构建诺莫图对各分类标准进行赋分。再次收集6组细胞株细胞的数据对模型的分类效能进行盲测,结果提示模型可以分类出绝大部分胶质瘤细胞,总体真阳性率为80.6%,真阴性率为88.9%。收集山西省人民医院神经外科术中切除的胶质瘤样本3例进行免疫组化分析及原代细胞培养,使用微流控通道对稳定培养的原代胶质瘤细胞进行处理,获取数据并验证模型,最终结果显示本课题的检测方法在胶质母细胞瘤样本中的肿瘤细胞检出率为87.5%,同时随着肿瘤级别的提升检出率逐渐提升。结论:通过多重收缩微流控通道收集细胞的生物物理学特征,可以检测出胶质瘤细胞并具有很高的准确性,有望成为一种新的胶质瘤细胞检测方法应用在快速诊断和循环肿瘤细胞的检测中。
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