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目的：分析我国重庆大鼠卡氏肺孢子虫的二氢叶酸还原酶（DHFR）和二氢叶酸合成酶（DHPS）基因的序列特性，应用PCR限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术分析DHPS基因的变异。
方法：（1）用地塞米松磷酸钠注射液腹股沟皮下注射的方法，用SD大鼠建立肺孢子虫肺炎动物模型。（2）实验分组：正常对照组（正常大鼠），阴性对照组（给磺胺药的正常大鼠），阳性对照组（建立Pc模型未给磺胺药的大鼠）和实验组（建立Pc模型并用磺胺药治疗的大鼠）。（3）肺组织印片六亚甲基四胺银染色观察卡氏肺孢子虫（Pneumocystis carinii，Pc）包囊，肺组织切片苏木素—伊红（hematoxylin—eosin，HE）染色观察其病理变化。（4）收集大鼠的肺组织，提取DNA，用PCR方法扩增卡氏肺孢子虫的DHFR和DHPS基因，纯化扩增产物后测序。检索基因文库（Gene bank，gb），进行同源性分析。（5）用AccⅠ和HaeⅢ两神酶对DHPS基因的PCR扩增产物进行酶切，并应用PCR—RFLP技术对其进行分析。
结果：（1）实验组和阳性对照组大鼠全部感染Pc，正常对照组和阴性对照组未发现Pc。（2）实验组和阳性对照组的Pc DHFR和DHPS基因PCR扩增均呈阳性，阴性对照组和正常对照组无扩增。实验组和阳性对照组Pc DHFR有832个碱基，与gb[M26495]（Pc f.sp. rat）序列比较，同源性均为99%，与gb[AF322061]（Pc f.sp. rat）序列比较，同源性均为100%。实验组大鼠Pc DHPS基因有816个碱基，与gb[U66283]（Pc f.sp。muris）、gb[U66282]（Pc f.sp. hominis）序列比较同源性分别为94%和83%。阳性对照组Pc DHPS基因序列有839个碱基，与gb[U66283]、gb[U66282]序列比较同源性分别为95%和84%。（3）通过限制性内切酶AccⅠ和HaeⅢ酶切电泳，应用PCR—RFLP技术分析实验组和阳性对照组大鼠Pc DHPS基因并未发现Ala55/Ser57位点的突变。
结论：（1）地塞米松磷酸钠皮下注射法是一种建立SD大鼠肺孢子虫肺炎动物模型的良好方法。（2）实验组和阳性对照组Pc DHFR和DHPS基因的PCR扩增均呈阳性，两个基因与Gene bank内相应的基因序列同源性较高。（3）PCR具有灵敏性好、分辨率高、重复性好、操作简便、快速等优点，适用于肺孢子虫肺炎的分子生物学诊断。（4）进行PCR—RFLP分析后发现我国重庆SD大鼠源肺孢子虫的DHPS基因为野生型。