脂肪酶是一种能够对长链甘油酯进行催化并使其发生水解的酶。脂肪酶独特的界面激活特性及立体选择性使其在有机合成、食品营养成分改良以及生物能源等行业中有着广泛的应用前景,酵母、细菌和真菌等微生物都可以生产脂肪酶。本文所研究的脂肪酶是一种来源于海洋微生物YS2071的碱性脂肪酶,本文对该脂肪酶的液体酶稳定性进行研究并得到一种稳定剂配方,以聚苯乙烯微球为载体采用物理吸附的方法对脂肪酶进行固定化,对固定化条件进行优化,并探究了固定化后的酶的性质,研究结果分述如下:液体脂肪酶稳定性研究:采用升温加速方法,考察影响海洋微生物YS2071液体脂肪酶活力稳定性的各种因素,研究该酶的失活动力学模型,优选出提高酶活稳定性的添加剂,进行正交实验,得到复合稳定剂的较佳配方,配方为:甘油含量6%,山梨醇含量9%,果糖含量9%,苯甲酸钠含量1.7%,氯化钙浓度15 mM,山梨酸钾含量0.5%,最稳定pH为9。稳定剂配方的加长时效试验表明,加入该配方后,液体脂肪酶YS2071在25℃放置90天的酶活保留率达91.29%,和不添加保护剂的对照样品相比,酶活保留率提高70.1%,极大地提高了该液体脂肪酶的稳定性。以聚苯乙烯微球为载体固定化脂肪酶:尝试了不同基团和不同粒径大小的聚苯乙烯微球进行脂肪酶固定化的筛选,实验结果显示粒径为0.6-1μm氨基聚苯乙烯微球有最佳的固定化效果,并选取该氨基聚苯乙烯微球对脂肪酶进行吸附。使用该氨基聚苯乙烯微球进行脂肪酶固定化的最佳条件为:加酶量5 mg/mL,pH为10,温度20℃,固化时间6 h,震荡速率250 rpm/min。最终酶活回收率达到42.82%。固定化脂肪酶性能研究:和游离酶相比,固定化脂肪酶的稳定性明显增强,尤其表现在温度稳定性、pH稳定性明显增强,对有机溶剂以及金属离子的耐受性明显提高;25℃储存30天,与游离酶相比酶活保留率提升15.09%;固定化酶重复利用5次后,相对酶活还保留有63.77%,重复使用10次后,其相对酶活仍保留有29%,有更加良好的操作稳定性。