论文部分内容阅读
本论文在中医药理论指导下,以川产道地药材蓬莪术为研究对象,运用现代科学技术手段,立足于“在体—体外—体内”三个层面,分别采用大鼠单向肠灌流模型、体外肿瘤细胞株模型、大鼠血瘀模型考察蓬莪术醋制前后的有效成分的体内外过程差异,探寻蓬莪术醋制机理的科学内涵。 蓬莪术挥发油醋制前后主要药效成分在体肠吸收差异性对比研究中,建立大鼠原位十二指肠、空肠、回肠吸收灌注模型,采用HPLC方法测定莪术醇和吉马酮的剩余量,获取蓬莪术醋制前后主要药效成分在小肠不同肠段的吸收动力学参数。比较各组中莪术醇和吉马酮在各肠段的吸收速率常数Ka以及有效表观渗透吸收Peff的差异,结果显示,蓬莪术生品和醋品中莪术醇和吉马酮在小肠各个肠段(十二指肠、空肠、回肠)的吸收具有一定差别,醋制后增加了其在空肠和回肠段的吸收;蓬莪术生品中莪术醇表现为十二指肠>回肠>空肠(p<0.01),吉马酮表现为十二指肠>空肠>回肠(p<0.01);蓬莪术醋品中莪术醇和吉马酮都表现为十二指肠>空肠>回肠(p<0.01)。蓬莪术生品和醋品中两个有效成分的最佳吸收肠段都是十二指肠。 蓬莪术挥发油醋制前后对体外肿瘤细胞增殖作用的研究中,用CCK-8法检测了蓬莪术醋制前后挥发油对人乳腺癌MCF-7、 MDA-MB-231细胞株和人结、直肠癌SW620、HCT-116细胞株的抑制率,并计算其半数抑制浓度IC50值,结果显示用蓬莪术醋制前后挥发油分别处理后,其生长均受到不同程度的抑制作用,且呈现出浓度依赖。考察蓬莪术生品及醋品挥发油对不同的肿瘤细胞在体外的抑制作用,作用最明显的均为人结肠癌SW620细胞株,表明可能对SW620细胞株的选择性作用强;同时,醋制前后挥发油作用于同一组细胞株,细胞毒作用都是生品组>醋品组,醋制对蓬莪术在肿瘤细胞的作用影响较大,细胞毒活性明显降低。 蓬莪术醋制前后对性成熟期雌性大鼠的毒性变化的研究中,建立血瘀证模型,观察蓬莪术醋制前后对性成熟期雌性大鼠的体征变化及其性器官生长的毒性变化。实验结果显示,与正常对照组相比,蓬莪术生品和醋品组的体重增量明显较慢;而卵巢湿重与卵巢系数均有显著升高,说明可能是蓬莪术促进了大鼠雌激素的分泌,使卵巢增重,可能造成了子宫内膜增生;莪术生品较醋品组作用明显,提示在中医症候模型下莪术醋制后对大鼠偏性减弱,为指导临床的安全用药提供了一定标准。 本实验的创新之处在于首次将在体肠吸收模型引入蓬莪术醋制机理的研究中,同时将醋制与在体吸收、体外细胞增殖及体内药效相结合,对川产道地药材蓬莪术的醋制机理进行探寻,立足于“在体—体外—体内”三个层面,“细胞—动物”两个水平,发现醋制后对蓬莪术在不同方向有不同程度的影响,探讨了蓬莪术醋制机理的科学内涵。