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目的:探讨薯蓣皂苷(dioscin)对顺铂与阿霉素诱导肾毒性的保护作用,并探讨可能的分子机制。方法:(1)在薯蓣皂苷抗顺铂(Cisplatin,CDDP)诱导的肾毒性实验中,NRK-52E和HK-2细胞经不同浓度薯蓣皂苷预处理后,再用9μg/m L CDDP处理24 h建立细胞损伤模型,MTT法检测细胞活力。体内实验中,48只Wistar雄性大鼠随机分成空白组、单纯给药组(Dio 40 mg/kg)、模型组(CDDP)、高剂量组(CDDP+Dio40 mg/kg)、中剂量组(CDDP+Dio 20 mg/kg)、低剂量组(CDDP+Dio 10 mg/kg),连续口服给药12天;48只C57BL/6J雄性小鼠随机分成空白组、单纯给药组(Dio60 mg/kg)、模型组(CDDP)、高剂量组(CDDP+Dio 60 mg/kg)、中剂量组(CDDP+Dio 30 mg/kg)、低剂量组(CDDP+Dio 15 mg/kg),连续口服给药10天;给药7天后一次性腹腔注射CDDP(大鼠7 mg/kg;小鼠25 mg/kg),末次给药4 h后处死实验动物;考察大鼠体重变化,检测BUN、Cr水平和组织MDA、SOD、GSH、GSH-Px等水平,观察肾脏组织病理结构变化;分子机制研究中,采用双荧光素酶报告基因实验、免疫荧光、Real-time PCR、Western blotting、mimics和si RNA转染等方法考察薯蓣皂苷对mi R-34a/Sirt1信号通路相关蛋白或基因表达的影响,并采用Auto Dock分子对接技术对薯蓣皂苷抗CDDP诱导肾毒性可能的药物作用靶点进行了预测。(2)在薯蓣皂苷抗阿霉素(Doxorubicin,Dox)诱导的肾毒性实验中,NRK-52E和HK-2细胞用不同浓度薯蓣皂苷预处理后,用5μM Dox处理24 h建立细胞损伤模型,MTT法检测细胞活力。体内实验中,48只Wistar雄性大鼠随机分成空白组、单纯给药组(Dio 40 mg/kg)、模型组(CDDP)、高剂量组(CDDP+Dio 40mg/kg)、中剂量组(CDDP+Dio 20 mg/kg)、低剂量组(CDDP+Dio 10 mg/kg),连续口服给药14天,给药7天后一次性腹腔注射Dox(15 mg/kg),末次给药4 h后处死大鼠;检测BUN、Cr水平和组织MDA、SOD、GSH、GSH-Px等水平,观察肾脏组织病理结构变化;在分子机制研究中,采用免疫荧光、Real-time PCR、si RNA干扰、抑制剂、Western blotting等技术探讨薯蓣皂苷对FXR信号通路相关蛋白或基因表达的影响,并采用Auto Dock分子对接技术预测了薯蓣皂苷和FXR的相互作用关系。结果:(1)在抗CDDP诱导肾毒性实验中,薯蓣皂苷显著改善CDDP诱导NRK-52E和HK-2细胞损伤,降低ROS水平;体内研究表明,与模型组相比,薯蓣皂苷显著下调血清BUN、Cr、MDA水平,升高SOD、GSH和GSH-Px水平,显著改善肾组织细胞刷状缘脱落、线粒体肿胀,减轻肾损伤。分子机制研究表明,与模型组相比,薯蓣皂苷显著下调mi R-34a水平,激活Sirt1,促进Nrf2胞核转移,上调HO-1、GST、GCLC和GCLM抗氧化蛋白的表达水平,抑制NF-κB核易位,下调AP-1、COX-2和HMGB-1等蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验表明薯蓣皂苷对Sirt1的调控至少是通过mi R-34a实现的,薯蓣皂苷能抵抗mi R-34a过表达引起的Sirt1通路抑制,基因转染和抑制剂实验证实薯蓣皂苷是介导mi R-34a/Sirt1信号通路改善炎症和氧化应激抗CDDP诱导的肾毒性,分子对接技术初步预测Keap1和NF-κB p65蛋白可能是薯蓣皂苷抗CDDP肾毒性的药物作用靶点。(2)在抗Dox诱导肾毒性实验中,薯蓣皂苷显著改善Dox诱导的NRK-52E和HK-2细胞损伤,显著降低ROS水平;体内研究表明,与模型组相比,薯蓣皂苷显著下调BUN、Cr、MDA水平,升高SOD、GSH和GSH-Px水平,显著减轻肾损伤;分子机制研究表明,与模型组相比,薯蓣皂苷显著上调FXR、p-AMPKα蛋白表达,促进Nrf2胞核转移,上调HO-1和GST抗氧化蛋白表达,抑制NF-κB和HMGB1的核易位,si RNA干扰和抑制剂实验证实薯蓣皂苷抗Dox诱导肾毒性的作用靶点是FXR信号通路,初步分子对接发现薯蓣皂苷抗Dox肾毒性的药物作用靶点是FXR蛋白。结论:(1)薯蓣皂苷介导mi R-34a/Sirt1信号通路调控氧化应激和炎症抗CDDP肾毒性;(2)薯蓣皂苷介导FXR信号通路抗Dox肾毒性。总之,薯蓣皂苷在抗顺铂与阿霉素肾毒性方面具有较大的研究和开发价值。