基于免疫技术的纺织品文物种属鉴定研究

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中国是世界上最早生产纺织品的国家之一。早在原始社会,人们就掌握了简单的纺织技术,通过搓、编、织将野生的麻做成衣服,以取代防寒保暖、遮羞蔽体的动物毛皮。随着农业、桑蚕业和畜牧业的发展,形成了以麻、丝、毛的为主要纺织原材料的中国古代纺织品体系。在漫长的历史长河中,纺织品文物见证了我国社会更替、经济发展和文化交融,是研究我国古代社会经济技术文化水平的珍贵史料。目前出土的纺织品中,蛋白类纺织品所占比例较大。该类纺织品易受到墓葬环境中水分、温度、酸碱度及微生物等影响而发生老化分解,从而引起大分子链的断裂,肽段的降解,出土时已成为碎片、微痕迹。因此,针对蛋白类纺织品文物的特点,建立科学有效的方法确定纺织品文物的种属,对追溯纺织品起源和研究人类文明有着十分重要的意义。本论文通过研究纺织品文物的特征蛋白,对比氨基酸序列筛选出特征多肽片段为半抗原,偶联载体蛋白,得到完全抗原;通过动物免疫和纯化鉴定,制备特异性抗体;对所得抗体的效价、灵敏度、特异性等性能进行测试评估,建立基于特异性抗体的酶联免疫检测方法,对蚕丝、羊毛、皮制品进行检测,从而实现对古代纺织品文物的种属鉴定。1)以桑蚕丝素蛋白的特征氨基酸序列为半抗原,制备兔抗桑蚕丝素蛋白抗体。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定对抗原的检出限达到158.49 ng/mL。进一步对蚕丝和丝织品进行检测,家蚕丝呈阳性结果,野蚕丝均呈阴性结果,可以有效地将家蚕丝从野蚕丝中鉴别出来。通过对文物样进行种属鉴定,确定两种文物样均为家蚕丝织品。2)以山羊毛角蛋白的特征氨基酸序列为半抗原和绵羊毛中提取的角蛋白为完全抗原,制备得到兔抗角蛋白P抗体和K抗体。P抗体和K抗体对抗原的检出限分别为6.81 ng/mL和81.39 ng/m L。采用两种抗体对羊毛和文物样进行检测,均呈阳性结果,证明文物样确实为羊毛织品。对两种羊毛进行蛋白组学测试,得到山羊毛的两种特征角蛋白片段分别为Q6R650、Q6R649。3)以牛皮胶原蛋白的特征氨基酸序列为半抗原,制备兔抗牛皮胶原蛋白抗体。采用ELISA测定对抗原的检出限达到904.74 ng/m L。对皮类样品进行检测,牛皮呈阳性结果,羊皮呈弱阳性结果。综上所述,本论文探索建立了基于免疫技术的蚕丝种属鉴定技术,为追溯丝绸起源提供了新的方法,也为古代蛋白类材料的种属鉴定开拓了新思路。
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