金钱草联合碳酸锂对草酸钙肾结石大鼠肠道菌群的影响

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目的:本实验旨在利用高通量测序的方法探讨中药金钱草联合西药碳酸锂,对草酸钙结石大鼠肠道菌群的影响。方法:采用1%乙二醇溶液自由饮水及2%氯化铵2ml灌胃的方法建立实验性草酸钙肾结石大鼠模型,以金钱草及碳酸锂作为药物干预手段,以枸橼酸钾作为治疗药物对照组。SPF级雄性SD大鼠48只,随机分成8组(n=6):空白组(Z组)、成石组(M组)、金钱草治疗组(JQC组)、碳酸锂治疗组(L组)、柠檬酸钾治疗组(PC组)、金钱草联合低剂量碳酸锂治疗组(JLD组)、金钱草联合中剂量碳酸锂治疗组(JLZ组)、金钱草联合高剂量碳酸锂治疗组(JLG组)。各组大鼠在相同条件下干预56天后将大鼠进行标本收集。取各组大鼠粪便标本,提取标本中原核生物全基因组后采用16S rDNA V3/V4区基因测序方法分析菌群结构。左肾组织在显微镜下观察组织病理学改变和结晶沉淀的情况。探讨药物干预对草酸钙肾结石大鼠肠道菌群变化的影响。结果:(1)大鼠左肾石蜡切片结果:M组草酸钙结晶呈粗大广泛成堆结晶、连接成片状;JQC组、JLD组、JLZ组、PC组的晶体形成均少于M组;L组与JLG组组内表现不一致。(2)高通量测序分析结果:药物治疗组肠道菌群的相对丰度及物种多样性均高于Z组及M组;JLZ组与PC组在肠道菌群的相对丰度及物种多样性一致性较高。(3)在门水平上,各分组均检测出8个菌门。其中厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、变形菌门(Proteobacteria)、软壁菌门(Tenericutes)占99%以上。JLG组在软壁菌门、放线菌门、拟杆菌门、厚壁菌门水平上均有明显差异;其余各组门水平差异不明显。(4)在属水平上,乳杆菌属(Lactobacillus)为各组的优势菌属,但其菌群相对丰度受成石剂及药物影响而不同。结论:肠道菌群在维持机体健康方面发挥着重要的作用,其结构及数量的改变与包括泌尿系结石在内的多种疾病有关,对于泌尿系结石来说多种肠道菌群的相互协同作用共同维持着机体草酸水平的稳定,虽然多种协同作用的肠道微生物与专性降解草酸的产甲酸草酸杆菌相比之下,在功能上不如其专一和特异,但其他菌群的作用不容小觑。金钱草联合碳酸锂可通过影响肠道菌群的构成及数量从而影响草酸钙晶体在大鼠肾脏的形成和沉积;在联合菌属中,乳杆菌属起至关重要的作用,且受药物影响后变化最明显。金钱草、碳酸锂及金钱草联合碳酸锂均有影响草酸钙结石大鼠肠道菌群数量及菌群结构的能力,且不同碳酸锂的浓度对肠道菌群影响不同。
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