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目的:研究良性甲状腺结节（Benign Thyroid Nodule,BTN）和/或甲状腺癌（Thyroid Cancer,TC）患者体内血清25-羟维生素D2（25-hydroxyvitamin D2,25-（OH）D2）、25-羟维生素D3（25-hydroxyvitamin D3,25-（OH）D3）及总25-羟维生素D（Total 25-hydroxyvitamin D,25-（OH）D）水平变化,探讨血清25-（OH）D2、25-（OH）D3、总25-（OH）D水平与BTN和/或TC发病风险的相关性,旨在为BTN和/或TC的精准诊疗及发病风险预测提供实验室依据。方法:选取2018年7月至2020年1月间于大连大学附属中山医院首次确诊为BTN和TC的236例患者作为研究对象,分为BTN组（N=118）和TC组（N=118）,以同期入院健康体检人员为对照组（N=118）,所有入选对象均已签署知情同意书,收集并整合研究对象的一般信息和临床资料。抽取所有入选对象的5mL静脉全血并分离血清备用,应用液相-色谱串联质谱仪（Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS）检测血清25-（OH）D2、25-（OH）D3、总25-（OH）D水平。应用化学发光免疫分析仪检测反映甲状腺功能以下项目的血清水平:游离三碘甲状腺原氨酸（Free Triodothyronine,FT3）、游离甲状腺素（Free Thyroxine,FT4）、促甲状腺激素（Thyroid Stimulating Hormone,TSH）、甲状腺过氧化物酶抗体（Thyroid Peroxidase Antibody,TPO-Ab）、甲状腺球蛋白抗体（Thyroglobulin Antibody,Tg-Ab）。应用SPSS（23.0版本）统计学软件分析比较各分组间及各实验检测指标的水平变化,用多因素Logistic回归模型评估分析人血清三种25-（OH）D水平与BTN和/或TC的发病风险相关性,以95%置信区间（Confidence intervals,CI）的优势比（Odds ratio,OR）作为疾病关联的衡量标准,用Spearman相关性分析方法分析变量间的相关性。结果:BTN组、TC组、对照组中研究对象的一般信息和临床资料数据表明:TC组中患者的女性性别占比高于对照组（P<0.05）;BTN组、TC组中患者的家族遗传病史率均明显高于对照组（P<0.05）;其它因素如吸烟、饮酒、体重指数（Body Mass Index,BMI）、维生素D及钙剂服用史、放射线暴露史、反映甲状腺功能的检测指标（FT3、FT4、TSH、Tg-Ab、TPO-Ab）血清水平,在BTN组、TC组与对照组比较中均无统计学意义差别（P>0.05）。与对照组比较,BTN组或TC组中研究对象的血清三种25-（OH）D水平:25-（OH）D2、25-（OH）D3、总25-（OH）D水平,采血时接受强、弱不同两组光照强度研究对象的血清三种25-（OH）D水平,以及不同营养状况（缺乏、不足、正常）研究对象的血清三种25-（OH）D水平,均与BTN或TC发病风险有关（P<0.05）。在校正混杂因素后的Logistic回归模型分析结果表明:BTN发病风险升高与人血清25-（OH）D营养状态降低相关（正常vs不足:OR=3.934,95%CI:1.682-9.200;正常vs缺乏:OR=27.979,95%CI:9.875-79.274,P<0.05）。BTN发病风险降低与人血清25-（OH）D3及总25-（OH）D水平升高相关（Q4 vs Q1:OR=0.054,95%CI:0.017-0.170,P<0.05;Q4 vs Q1:OR=0.043,95%CI:0.013-0.147,P<0.05）,而与人血清25-（OH）D2水平降低相关（Q4 vs Q1:OR=7.310,95%CI:2.321-23.027,P<0.05）。与血清25-（OH）D水平正常组人群比较,血清25-（OH）D水平不足及缺乏组人群TC发病风险升高（正常vs不足:OR=5.312,95%CI:1.949-14.479;正常vs缺乏:OR=34.528,95%CI:10.212-131.623,P<0.05）。TC发病风险降低与人血清25-（OH）D3及总25-（OH）D水平升高相关（Q4 vs Q1:OR=0.022,95%CI:0.006-0.079,P<0.05;Q4 vs Q1:OR=0.032,95%CI:0.010-0.103,P<0.05）,而与人血清25-（OH）D2水平无明显相关（P>0.05）。Spearman相关分析结果表明,血清25-（OH）D3及总25-（OH）D水平仅与反映甲状腺功能指标的FT3水平呈正相关（r=0.108;r=0.105,P<0.05）,而与其它检测指标无关。结论:BTN或TC发病风险升高与人体内低营养状态25-（OH）D相关。BTN发病风险与人血清25-（OH）D3及总25-（OH）D水平呈负相关;TC发病风险与人血清25-（OH）D3及总25-（OH）D水平呈负相关,而与血清25-（OH）D2水平无明显相关。人血清25-（OH）D分类检测可为BTN和TC的发病风险关系提供可靠实验室依据。