目的:二甲双胍(metformin,MET)是临床上治疗Ⅱ型糖尿病的常用药物。近年来的研究还发现MET具有抗炎、抗氧化作用,这些效应主要依赖于腺苷酸活化蛋白激酶(AMP activated protein kinase,AMPK)。由对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)所诱导的急性肝损伤是临床上研究药物性肝炎的重要模型。APAP诱导的急性肝炎与其在肝脏内代谢产生的毒性物质有关,肝细胞内经CYP450酶系代谢转化APAP可生成高活性的亲电子物N-乙酰对苯醌亚胺(N-acetyl-p-benzo-quinone imine,NAPQI)。NAPQI可引起肝细胞内的氧化应激和炎症反应并造成肝组织损伤。本文旨在探讨MET对APAP诱导的急性中毒性肝炎的潜在保护效应以及与AMPK之间的关联。方法:雄性昆明小鼠6-8周龄,体重18-20 g,腹腔注射APAP(350mg/kg,溶于预热的PBS)诱导急性中毒性肝炎。为探讨MET的潜在保护效应,400 mg/kg的MET(溶于PBS)在APAP暴露前0.5 h经腹腔注入。为探讨MET是否通过AMPK发挥效应,一批小鼠在MET注入前0.5 h经腹腔注入AMPK抑制剂dorsomorphin(15 mg/kg,溶于聚乙二醇溶液),另一批小鼠在APAP暴露前0.5 h经腹腔注入AMPK激活剂A-769662(30 mg/kg,溶于聚乙二醇溶液)。各组动物在APAP暴露8 h后处死,及时采集血液样本和肝组织样本。血液样本中TNF-α和il-6水平采用elisa法测定;使用化学显色试剂盒检测血液样本中谷丙、谷草转氨酶水平,检测肝组织中反映脂质氧化的指标丙二醛(malondialdehyde,mda)含量及过氧化氢酶(catalase,cat)活性。肝组织经福尔马林固定后,常规he染色观察组织病理学变化。结果:本研究发现:(1)用met)处理apap诱导的急性肝炎模型,alt、ast上升的水平明显受抑,与此相一致的是,小鼠肝组织内mda水平的降低,血浆中tnf-α和il-6水平明显下调,以及肝组织病理损伤的减轻;(2)met的保肝效应不依赖于ampk:ampk抑制剂dorsomorphin联合共同处理不能阻断met对apap暴露小鼠血alt、ast上升的抑制效应;而ampk激活剂a-769662也不能模拟met对alt、ast上升的抑制效应。(3)前期发现cat可能是met发挥药理效应的新靶点,met处理可显著提升肝组织内的cat活性,ampk抑制剂联合处理不能阻断met对cat的激活效应,而ampk激活剂a-769662也不能模拟met对cat的激活效应,所以met以不依赖ampk的方式激活cat。结论:本研究数据表明met对由对apap诱导的急性中毒性肝炎具有保护作用,这一效应并非通过调节ampk来实现,可能与其增强cat活性及提升肝细胞抗氧化能力有关。结合相关文献及本实验室的实验资料:氧化应激是apap诱导中毒性肝炎的基本机制,因而我们认为met对apap诱导急性中毒性肝炎的保护效应可能与其增强cat活性有关。由此可见,met对cat的激活作用也是其不容忽视的药理学新效应,这对急性重症肝炎防治有一定启示。