论文部分内容阅读
目的从20味中药中筛选出对α-葡萄糖苷酶抑制作用较强的中药,对其提取工艺、酶抑制类型、降血糖作用及机理进行探讨。方法1.参考中医治疗糖尿病的长期实践报道和国家卫生部公布的药食同源和保健品名单初步遴选出20味中药,分别采用水提和醇提两种方法制备提取物,以麦芽糖为底物,以阿卡波糖为阳性对照,采用葡萄糖氧化酶法测定20味中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。2.选取抑制率最高的中药(桑白皮),采用单因素实验与正交设计相结合的方法优化其提取工艺。3.通过酶浓度-反应速度作图法确定桑白皮提取物抑制反应是否可逆,用Lineweaver-Burk(L-B)作图法确定其抑制反应的类型。4.用随机数字表将正常小白鼠随机分组,然后分别灌胃给药,每天1次,共7天,末次给药后进行麦芽糖负荷实验,尾尖采血,血糖仪测定血糖值。5.糖尿病模型小鼠采用腹腔注射链脲佐菌素法诱导,分组、给药和血糖测定等方法均同正常小鼠。6.实验过程中每日在给药前称量各组小鼠的摄食量和饮水量、隔日称量小鼠体重。结果1.20味中药水提液和醇提液对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,其中桑叶、桑白皮、山茱萸、玉竹、地骨皮的水提液抑制率较高,浓度为1000 mg/mL时抑制率分别为97.56%、95.89%、72.73%、80.22%和59.06%,桑白皮、桑叶、地骨皮、山茱萸、葛根的醇提液抑制率较高,浓度为1000 mg/mL时抑制率分别为98.94%、94.97%、94.78%、84.27%和81.00%,且这几种中药提取液对α-葡萄糖苷酶的抑制作用均呈现出一定的浓度效应关系,其中桑白皮的抑制作用与阿卡波糖最相近。2.桑白皮水提液的最佳提取工艺为固液比1：10、提取时间1.5h、提取次数3次；桑白皮醇提液的最佳提取工艺为乙醇浓度45%、固液比1：8、提取时间12 h。3.桑白皮水提液和醇提液对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均属于可逆性抑制中的非竞争性抑制。4.桑白皮各给药组和阿卡波糖组均能显著降低正常小鼠麦芽糖负荷后0.5 h和1h时的血糖值,与生理盐水组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)；但对正常小鼠的体重、饮水量和摄食量均无明显影响,与生理盐水组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。5.桑白皮水提物和醇提物高剂组均能显著降低糖尿病小鼠麦芽糖负荷后0.5h、1h、1.5h、2h血糖值,与生理盐水组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),且有类似于阿卡波糖的作用效果(P>0.05)；桑白皮水提物低剂组能显著降低糖尿病小鼠麦芽糖负荷后0.5 h血糖值,桑白皮醇提物低剂组能显著降低糖尿病小鼠麦芽糖负荷后0.5h、1h、1.5h血糖值,与生理盐水组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。且桑白皮各给药组和阿卡波糖组糖尿病小鼠的体重增加、饮水量和摄食量减少,与生理盐水组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论20味中药的水提物和醇提物对α-葡萄糖苷酶均有一定的抑制作用,其中,桑白皮提取物抑制作用最强,类似于阿卡波糖,对-葡萄糖苷酶的抑制类型属于非竞争性抑制,可降低正常小鼠和糖尿病小鼠负荷麦芽糖后的血糖峰值,调节其血糖水平,改善糖尿病小鼠多饮、多食和体重减轻等症状,减缓肠道麦芽糖等双糖的消化吸收可能是其降血糖作用机制之一。