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棉花不仅是我国人民衣着和纺织工业的主要原料,还是出口创汇的重要产品,关系国计民生,意义重大。而棉花黄萎病广泛分布于世界五大洲的各产棉区,严重威胁着棉花的可持续生产。黄萎病菌可通过突变、异核现象等引起变异,土壤、种子、病残体、棉籽壳和棉籽饼等都可作其传播途径,这使其防治较为困难。目前,通过分子手段进行抗病育种是防治该病害的理想措施。本研究制订了棉花黄萎病的田间防治技术并在田间实验基地对该技术进行了防治效果鉴定;以抗黄萎病品种中植棉KV-3作为植物材料,以强致病力菌株大丽轮枝菌V991作为接种病菌,筛选抗黄萎病相关基因;利用RACE和电子克隆等技术得到抗病基因全长;通过亚细胞定位技术和超表达技术分析目的基因的定位及功能。取得结果如下:1.以不采取任何措施和只使用生防制剂拌种作对照,研究棉花黄萎病田间防治技术的防效。实验结果显示,采用生防制剂拌种、施加有机肥、喷施叶面肥和控制早铃相结合的措施,具有防病增产效果。2.利用VIGS技术在中植棉KV-3中成功沉默了基因GhFLS2、GhMRH1、GhAGD13和GhWRKY29,对沉默植株进行抗病性测定发现,GhFLS2、GhMRH1、GhAGD13和GhWRKY29的沉默均在不同程度上导致抗病品种中植棉KV-3对黄萎病的抗性下降,其中GhAGD13和GhWRKY29两个基因的沉默使得中植棉KV-3的抗性下降程度最为显著（P<0.05）。对GhAGD13和GhWRKY29沉默植株的叶片进行苔盼蓝染色,发现它们的沉默导致叶片细胞坏死。3.通过RACE技术获得GhAGD13基因全长,该基因的5’UTR 121 bp,3’UTR 157 bp,ORF981 bp,共编码326个氨基酸;GhAGD13蛋白在N端有一个GAP结构域,包含一段特征性锌指结构域(Cys-X2-Cys-X(16,17)-X2-Cys),在C端有一个C2结构域,该结构域具有负电荷残基,这些负电荷残基主要由天冬氨酸提供,可作为钙离子的配体。用电子克隆技术获得GhWRKY29基因全长,GhWRKY29共编码279个氨基酸,有两个内含子,它的3’UTR 86 bp,5’UTR 272 bp,ORF 840 bp;GhWRKY29蛋白在N端有一个核定位信号,在C端有特征性DNA结合结构域,包括一个WRKY结构域,一个C2H2锌指状结构域。4.以烟草作为瞬时表达材料,通过亚细胞定位技术对GhAGD13和GhWRKY29进行亚细胞定位分析。结果显示,GhWRKY29定位在细胞核,而GhAGD13定位在细胞核和细胞质。5.将基因GhAGD13和GhWRKY29在拟南芥中进行异源表达,荧光定量PCR和植物叶片PCR结果均显示,目的基因成功在拟南芥中表达;对转基因植株进行抗病性鉴定,结果显示,转基因GhAGD13和GhWRKY29植株的病情指数分别为32.05和15.10,显著低于野生型（60.42）和转空载体（62.50）植株（P<0.05）,此结果进一步表明了GhAGD13和GhWRKY29参与陆地棉抗黄萎病过程。