生防芽孢杆菌对植物的促生作用及其机理的研究

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芽孢杆菌(Bacillus spp.)是存在于土壤和植物微生态系统中的优势微生物种群之一,具有很强的抗逆能力。自1926年Sanford报道土壤中某些拮抗性微生物对于土传病原菌具有抑制性以来,对芽孢杆菌的研究主要集中于植物病害的防治方面,关于其在植物促生方面的作用虽然近年来受到重视,但机理的研究尚不完备。现已报道的促生机理主要包括:产生植物生长调节剂、抑制病原微生物生长和诱导植物抗性等方面。芽孢杆菌是工业上生产蛋白酶的主要菌株,能够产生大量蛋白酶。对于芽孢杆菌产生的胞外蛋白酶在生物防治中的作用本实验室已进行了研究,但生防芽孢杆菌胞外蛋白酶在促进植物生长中的作用未见报道。已有大量事实证明,氨基酸肥料能够显著增加作物的产量,因此芽孢杆菌胞外蛋白酶在植物促生中的作用与地位值得研究。本文从作物根际土壤中分离得到的广谱拮抗生防细菌中筛选出一株高效水解鱼蛋白的生防芽孢杆菌T2,研究其鱼蛋白水解液对小白菜生长的影响,并对水解液中的促生成份进行了初步分析,具体结果如下:1.将从作物根际土壤中分离得到的对多种植物病原真菌具有拮抗作用的生防细菌进行鱼蛋白水解实验,筛选出一株高产蛋白酶的生防枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)T2(GenBank accession number:EF221612)作为实验菌株。2.以沿海废弃鱼蛋白为原料进行鱼蛋白水解实验,确定T2最佳水解时间为60小时,并制备T2水解液、酸水解液和自然浸提液。3.将各水解液适当稀释后,按相同的肽和氨基酸浓度分别添加到已灭菌土壤中进行盆栽实验。处理21天后,测定各水解液对小白菜植株鲜重、干重、硝酸还原酶和过氧化氢酶活力及主要营养品质的影响。结果显示,T2水解液处理明显好于酸水解液和自然浸提液,与对照相比,植株鲜重和干重分别提高了78.24%和34.35%,两种酶活力分别提高了27.87%和73.68%,Vc、多糖、叶绿素及全氮含量分别提高了15.24%、32.79%、28.16%和9.18%,而硝态氮含量降低了16.36%。4.植物根系是活跃的吸收器官和合成器官,根的活力水平直接影响地上部分的生长、营养状况及产量水平。在光照培养箱中,以含相同浓度肽和氨基酸的PG培养基培养、观察并分析T2水解液、酸水解液和自然浸提液处理对小白菜根系发育的影响。结果发现,T2水解液处理能够明显促进根系生长,增加小白菜根毛的长度和密度,有效地诱导不定根的形成。与对照相比,T2水解液处理植株的根系活力增加101.5%,而其它两组分别只增加25.6%和33.2%。5.以上结果发现,T2水解液对小白菜生长及根系发育具有明显的促进作用,说明其中存在一些能够促进植物生长的物质。对T2水解液中的植物生长激素IAA进行定性检测,结果呈阴性,但IAA前体物质色氨酸的含量明显高于其它两种水解液,表明生防芽孢杆菌胞外蛋白酶水解鱼蛋白产生的肽和氨基酸在促生中起了重要作用,而色氨酸即是其中之一。
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