[目的]　　 肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)是由激活的巨噬细胞产生的一种多功能细胞因子，其最显著的特征是在体内外能直接杀伤肿瘤细胞，是一种具有潜在应用价值的抗肿瘤生物制剂。使用染色体组TNF-α全长基因(含三个内含子)和cDNA基因构建真核表达载体，并转染真核细胞，观察外源TNF-α表达对细胞内自身TNF-α基因表达的影响；初步探讨TNF-α内含子对染色体组TNF-α基因表达的影响。　　 [方法]　　 从人Hella细胞中提取总RNA，RT-PCR扩增出TNF-α的cDNA基因序列并构建至真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中，重组载体命名为TF。从人Hella细胞中提取染色体组总DNA，用PCR方法扩增出全长TNF-α基因序列并构建至真核表达载pcDNA3.1(+)质粒中，挑取正向、反向质粒各一个(把neo基因与TNF-α cDNA的转录方向一致时的质粒，称为正向质粒；方向相反，则称为反向质粒)，测序证实后，重组正向质粒载体命名TIA，重组反向质粒载体命名为TIB。TF、TIA、TIB经脂质体瞬时转染CNE-2Z细胞、A549细胞、Hella细胞和K562细胞，转染48h后提取细胞总RNA分别进行RT-PCR分析检测内源性和外源性基因的表达情况。用体外诊断试剂盒检测肿瘤坏死因子的蛋白表达量。　　 [结果]　　 TF和TIA质粒经脂质体瞬时转染在CNE-2Z细胞，A549细胞，Hella细胞和K562细胞中成功；TF和TIA质粒在细胞内表达，TIB质粒在细胞内不表达；TIA质粒在转染CNE-2Z细胞、A549细胞、Hella细胞和K562细胞中产生的TNF-α的表达量比TF质粒转染细胞产生的表达量低。　　 [结论]　　 导入外源TNF-α全长基因序列和TNF-αcDNA序列均能使细胞内TNF-αmRNA表达的量和肿瘤坏死因子蛋白的表达量增加；而导入外源TNF-α全长基因序列比导入TNF-α cDNA序列使细胞内TNF-αmRNA和蛋白表达的量低。