论文部分内容阅读
紫薇(Lagerstroemia indica)是千屈菜科(Lythraceae)的一类重要观赏花木,大部分种类在炎夏开花,花色丰富艳丽,花期长达百日之久,是我国重要的夏季观花植物。组织培养技术可以在短期内获得大量表现一致的植物材料,便于进行种质资源保存及扩繁;同时组培技术也是进行遗传转化研究的基础。云南紫薇(Lagerstroemia intermedia)产自云南思茅及澜沧等地,是我国特有种。5月即进入盛花期,花期早且为常绿树种,是紫薇育种研究的重要亲本;由于人为的破坏,云南紫薇处于濒危状态,因此迫切需要建立组培快繁体系进行种质资源的保存。黑钻石紫薇(Black Diamond)是近年来由美国育种家培育出的终年紫色叶紫薇新品种,具有重要的应用推广价值,目前还未见关于黑钻石组培体系研究的报道,建立其组培快繁体系将为大规模的市场推广奠定基础。目前转基因育种是分子育种的热点,高效再生体系的建立是进行遗传转化研究及转基因育种的重要基础,紫薇属植物有关再生体系研究的报道较少,而且现在还没有可以用于进行遗传转化研究的高效再生体系。本研究以种子、枝条为外植体建立云南紫薇和黑钻石紫薇的组织培养体系,同时以未成熟胚、子叶和叶片为外植体建立紫薇品种’Sarah Favorite’和‘粉晶’的再生体系。试验结果如下:1、建立云南紫薇和黑钻石紫薇的组织培养体系。云南紫薇最佳丛生芽增殖系数7.3;黑钻石紫薇最佳丛生芽增殖系数8.5;生根率均达到100.0%。2、建立紫薇品种’Sarah Favorite’和‘粉晶’的再生体系。分裂素6-BA与不同种类的生长素配合使用时,有直接再生植株和形成愈伤组织两种途径。6-BA与NAA或者IBA配合使用时,易获得直接再生植株;6-BA与2,4-D配合使用时易诱导愈伤组织。紫薇品种’Sarah Favorite’和‘粉晶’未成熟胚为外植体,最佳愈伤组织诱导率为80.6%,最佳愈伤组织分化率为51.8%;直接再生率最高为38.3%。紫薇’Sarah Favorite’子叶为外植体愈伤组织的最佳诱导率为98.7%,最佳的分化率为53.4%;直接再生率最高为45.3%。云南紫薇和紫薇’Sarah Favorite’的叶片为外植体分别获得87.5%和45.6%的愈伤组织诱导率。对所获得的不定芽进行生根诱导,生根率为100.0%。对生根的无菌苗进行炼苗移栽获得80.0%以上的成活率。3、初步研究了紫薇属植物遗传转化的条件。试验结果表明用OD600值为0.6的农杆菌菌液,侵染预培养0 d的紫薇叶片10min,共培养2d的GUS瞬时表达效果最好。本研究建立了云南紫薇和黑钻石紫薇组织培养体系,有利于进行种质资源的保存和市场的推广应用;紫薇再生体系的建立为未来遗传转化及转基因研究奠定了基础。